CAJ | 학술논문

[目的]在不影响酵母正常代谢前提下,构建亚硫酸盐分泌量提高的基因工程菌株,增加二氧化硫生成量,有效地解决啤酒老化问题.[方法]以适量高产二氧化硫工业啤酒酵母突变株MS总DNA为模板,PCR方法得到带有不同长度5'端非编码区的基因片段SSU1-1、SSU1-2,以大肠杆菌－酿酒酵母穿梭质粒YEp352构建表达载体pSU1和pSU2,转化实验室酵母YS58,验证SSUI多克隆表达对其二氧化硫生成量的影响.进而将pSU2转化工业啤酒酵母MS,利用亚硫酸盐抗性筛选转化子,并对其二氧化硫和硫化氢生成量及其啤酒抗老化性能进行测定和分析.[结果]实验室酵母转化子pSU1-4和pSU2-3二氧化硫生成量较原株明显提高而硫化氢生成量基本不变,工业啤酒酵母转化子YZ二氧化硫生成量比原株MS提高74.4%,TBA值下降14.9%,DPPH自由基清除率提高38.2%,硫化氢生成量基本不变.[结论]SSUI基因的多拷贝表达有效提高了亚硫酸盐转运蛋白SsulP表达量,增加了亚硫酸盐分泌量,啤酒抗氧化能力得到明显增强,而对酵母硫代谢途径中亚硫酸盐还原为硫化物代谢过程没有影响.
[목적]재불영향효모정상대사전제하,구건아류산염분비량제고적기인공정균주,증가이양화류생성량,유효지해결비주노화문제.[방법]이괄량고산이양화류공업비주효모돌변주MS총DNA위모판,PCR방법득도대유불동장도5'단비편마구적기인편단SSU1-1、SSU1-2,이대장간균－양주효모천사질립YEp352구건표체재체pSU1화pSU2,전화실험실효모YS58,험증SSUI다극륭표체대기이양화류생성량적영향.진이장pSU2전화공업비주효모MS,이용아류산염항성사선전화자,병대기이양화류화류화경생성량급기비주항노화성능진행측정화분석.[결과]실험실효모전화자pSU1-4화pSU2-3이양화류생성량교원주명현제고이류화경생성량기본불변,공업비주효모전화자YZ이양화류생성량비원주MS제고74.4%,TBA치하강14.9%,DPPH자유기청제솔제고38.2%,류화경생성량기본불변.[결론]SSUI기인적다고패표체유효제고료아류산염전운단백SsulP표체량,증가료아류산염분비량,비주항양화능력득도명현증강,이대효모류대사도경중아류산염환원위류화물대사과정몰유영향.