山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2009年
51期
7-9
,共3页
徐亚吉%冯志强%古天明%朱敏侠%盘强文
徐亞吉%馮誌彊%古天明%硃敏俠%盤彊文
서아길%풍지강%고천명%주민협%반강문
三七总皂甙%马兜铃酸I%转分化%转化生长因子-β1%结缔组织生长因子
三七總皂甙%馬兜鈴痠I%轉分化%轉化生長因子-β1%結締組織生長因子
삼칠총조대%마두령산I%전분화%전화생장인자-β1%결체조직생장인자
目的 探讨三七总皂甙(PNS)治疗肾间质纤维化的作用机制.方法 将人肾小管上皮细胞(HK-2)按不同处理因素分为6组,空白对照组不予干预;PNS对照组加入PNS,使终质量浓度为 400 μg/ml;马兜铃酸I(AA I)诱导组加入AA I,终质量浓度为20 μg/ml;PNS低、中、高剂量组均加入AA I 20 μg/ml,同时分别加PNS 200、400、600 μg/ml.培养48 h后应用倒置相差显微镜观察细胞形态学变化;免疫组织化学法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;ELISA法测定细胞上清液中TGF-β1水平;RT-PCR法检测结缔组织生长因子(CTGF) mRNA表达.结果 AA I诱导组HK-2细胞从原来典型的上皮细胞形态转变为长梭形肌成纤维细胞形态,胞质内大量表达α-SMA,其积分光密度值、TGF-β1水平、CTGF mRNA表达均增加(P＜0.05);PNS各剂量组细胞形态学改变减轻,α-SMA、CTGF mRNA表达和TGF-β1分泌降低,且呈剂量依赖性(P＜0.05);PNS对照组各指标均无明显变化.结论 PNS可抑制AA I诱导的肾小管上皮细胞转分化作用,其机制可能是抑制TGF-β1及其下游因子CTGF表达.
目的 探討三七總皂甙(PNS)治療腎間質纖維化的作用機製.方法 將人腎小管上皮細胞(HK-2)按不同處理因素分為6組,空白對照組不予榦預;PNS對照組加入PNS,使終質量濃度為 400 μg/ml;馬兜鈴痠I(AA I)誘導組加入AA I,終質量濃度為20 μg/ml;PNS低、中、高劑量組均加入AA I 20 μg/ml,同時分彆加PNS 200、400、600 μg/ml.培養48 h後應用倒置相差顯微鏡觀察細胞形態學變化;免疫組織化學法檢測α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)錶達;ELISA法測定細胞上清液中TGF-β1水平;RT-PCR法檢測結締組織生長因子(CTGF) mRNA錶達.結果 AA I誘導組HK-2細胞從原來典型的上皮細胞形態轉變為長梭形肌成纖維細胞形態,胞質內大量錶達α-SMA,其積分光密度值、TGF-β1水平、CTGF mRNA錶達均增加(P＜0.05);PNS各劑量組細胞形態學改變減輕,α-SMA、CTGF mRNA錶達和TGF-β1分泌降低,且呈劑量依賴性(P＜0.05);PNS對照組各指標均無明顯變化.結論 PNS可抑製AA I誘導的腎小管上皮細胞轉分化作用,其機製可能是抑製TGF-β1及其下遊因子CTGF錶達.
목적 탐토삼칠총조대(PNS)치료신간질섬유화적작용궤제.방법 장인신소관상피세포(HK-2)안불동처리인소분위6조,공백대조조불여간예;PNS대조조가입PNS,사종질량농도위 400 μg/ml;마두령산I(AA I)유도조가입AA I,종질량농도위20 μg/ml;PNS저、중、고제량조균가입AA I 20 μg/ml,동시분별가PNS 200、400、600 μg/ml.배양48 h후응용도치상차현미경관찰세포형태학변화;면역조직화학법검측α-평활기기동단백(α-SMA)표체;ELISA법측정세포상청액중TGF-β1수평;RT-PCR법검측결체조직생장인자(CTGF) mRNA표체.결과 AA I유도조HK-2세포종원래전형적상피세포형태전변위장사형기성섬유세포형태,포질내대량표체α-SMA,기적분광밀도치、TGF-β1수평、CTGF mRNA표체균증가(P＜0.05);PNS각제량조세포형태학개변감경,α-SMA、CTGF mRNA표체화TGF-β1분비강저,차정제량의뢰성(P＜0.05);PNS대조조각지표균무명현변화.결론 PNS가억제AA I유도적신소관상피세포전분화작용,기궤제가능시억제TGF-β1급기하유인자CTGF표체.
