中国水产科学
中國水產科學
중국수산과학
Journal of Fishery Sciences of China
2012年
1期
1-12
,共12页
么宗利%应成琦%周凯%王慧%来琦芳
麽宗利%應成琦%週凱%王慧%來琦芳
요종리%응성기%주개%왕혜%래기방
凡纳滨对虾%高碳酸盐碱度%基因表达%SSH%定量PCR
凡納濱對蝦%高碳痠鹽堿度%基因錶達%SSH%定量PCR
범납빈대하%고탄산염감도%기인표체%SSH%정량PCR
以广盐性养殖的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)为研究对象,采用抑制消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)和定量PCR的方法,研究其在高碳酸盐碱度胁迫下转录组水平的基因表达差异,以期从基因组水平研究对虾对高碳酸盐碱度胁迫的适应机制.结果表明,以高碳酸盐碱度(20 mmol/L)胁迫第4天凡纳滨对虾鳃组织和低碱度(2mmol/L)对照组鳃组织为材料,通过斑点杂交筛选,发现鳃组织中有158个克隆子表达上调,291个克隆子表达下调.挑选150个高表达差异的克隆子进行测序,获得100个序列,其中50个得到成功注释.经过GO分析,这些注释的差异基因主要分为8大类群,其中碳酸酐酶基因(CA)、Na+-K+-ATPase基因(NKA-α)等与离子调控相关的基因表达量上调,而溶菌酶基因等与先天免疫相关的基因表达量下调,这些结果表明高碳酸盐碱度胁迫下,凡纳滨对虾以增加离子调控的方式进行酸碱平衡的调控,同时其免疫功能受到抑制.此外,还对CA和NKA-α两个基因在鳃和触角腺中的时空表达规律进行了研究,发现高碳酸盐碱度胁迫9d过程中,两个基因在鳃组织中的表达均呈现先高表达后回落的现象,而在触角腺中NKA-α基因则一直维持较高表达水平,说明CA和NKA-α基因在凡纳滨对虾高碳酸盐碱度适应离子调控中起着关键作用,同时还发现除了鳃组织之外,触角腺同样参与了调控.本研究从转录水平初步筛选了高碳酸盐碱度胁迫下凡纳滨对虾的表达差异基因,探索了凡纳滨对虾的耐盐碱机制,对培育适于盐碱地水产养殖的优良品种有着重要的意义.
以廣鹽性養殖的凡納濱對蝦(Litopenaeus vannamei)為研究對象,採用抑製消減雜交(suppression subtractive hybridization,SSH)和定量PCR的方法,研究其在高碳痠鹽堿度脅迫下轉錄組水平的基因錶達差異,以期從基因組水平研究對蝦對高碳痠鹽堿度脅迫的適應機製.結果錶明,以高碳痠鹽堿度(20 mmol/L)脅迫第4天凡納濱對蝦鰓組織和低堿度(2mmol/L)對照組鰓組織為材料,通過斑點雜交篩選,髮現鰓組織中有158箇剋隆子錶達上調,291箇剋隆子錶達下調.挑選150箇高錶達差異的剋隆子進行測序,穫得100箇序列,其中50箇得到成功註釋.經過GO分析,這些註釋的差異基因主要分為8大類群,其中碳痠酐酶基因(CA)、Na+-K+-ATPase基因(NKA-α)等與離子調控相關的基因錶達量上調,而溶菌酶基因等與先天免疫相關的基因錶達量下調,這些結果錶明高碳痠鹽堿度脅迫下,凡納濱對蝦以增加離子調控的方式進行痠堿平衡的調控,同時其免疫功能受到抑製.此外,還對CA和NKA-α兩箇基因在鰓和觸角腺中的時空錶達規律進行瞭研究,髮現高碳痠鹽堿度脅迫9d過程中,兩箇基因在鰓組織中的錶達均呈現先高錶達後迴落的現象,而在觸角腺中NKA-α基因則一直維持較高錶達水平,說明CA和NKA-α基因在凡納濱對蝦高碳痠鹽堿度適應離子調控中起著關鍵作用,同時還髮現除瞭鰓組織之外,觸角腺同樣參與瞭調控.本研究從轉錄水平初步篩選瞭高碳痠鹽堿度脅迫下凡納濱對蝦的錶達差異基因,探索瞭凡納濱對蝦的耐鹽堿機製,對培育適于鹽堿地水產養殖的優良品種有著重要的意義.
이엄염성양식적범납빈대하(Litopenaeus vannamei)위연구대상,채용억제소감잡교(suppression subtractive hybridization,SSH)화정량PCR적방법,연구기재고탄산염감도협박하전록조수평적기인표체차이,이기종기인조수평연구대하대고탄산염감도협박적괄응궤제.결과표명,이고탄산염감도(20 mmol/L)협박제4천범납빈대하새조직화저감도(2mmol/L)대조조새조직위재료,통과반점잡교사선,발현새조직중유158개극륭자표체상조,291개극륭자표체하조.도선150개고표체차이적극륭자진행측서,획득100개서렬,기중50개득도성공주석.경과GO분석,저사주석적차이기인주요분위8대류군,기중탄산항매기인(CA)、Na+-K+-ATPase기인(NKA-α)등여리자조공상관적기인표체량상조,이용균매기인등여선천면역상관적기인표체량하조,저사결과표명고탄산염감도협박하,범납빈대하이증가리자조공적방식진행산감평형적조공,동시기면역공능수도억제.차외,환대CA화NKA-α량개기인재새화촉각선중적시공표체규률진행료연구,발현고탄산염감도협박9d과정중,량개기인재새조직중적표체균정현선고표체후회락적현상,이재촉각선중NKA-α기인칙일직유지교고표체수평,설명CA화NKA-α기인재범납빈대하고탄산염감도괄응리자조공중기착관건작용,동시환발현제료새조직지외,촉각선동양삼여료조공.본연구종전록수평초보사선료고탄산염감도협박하범납빈대하적표체차이기인,탐색료범납빈대하적내염감궤제,대배육괄우염감지수산양식적우량품충유착중요적의의.