上海交通大学学报(医学版)
上海交通大學學報(醫學版)
상해교통대학학보(의학판)
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)
2012年
5期
536-542
,共7页
李丽喜%章素芳%张鑫%乐卫东
李麗喜%章素芳%張鑫%樂衛東
리려희%장소방%장흠%악위동
阿尔茨海默病%脊髓%淀粉样斑块%自噬
阿爾茨海默病%脊髓%澱粉樣斑塊%自噬
아이자해묵병%척수%정분양반괴%자서
目的 研究阿尔茨海默病(AD)小鼠大脑和脊髓自噬变化情况.方法 分离3月、8月和11月龄AD小鼠和同龄正常对照小鼠(n=6)的大脑和脊髓,左侧半脑和脊髓腰段用于组织切片的制备,右侧半脑及剩余脊髓用于提取蛋白.采用免疫组织化学方法观察脑内和脊髓淀粉样斑块;激光共聚焦显微镜观察自噬指标LC3在脑内和脊髓运动神经元中的分布情况;Westernblotting检测8月龄小鼠大脑及脊髓LC3-Ⅱ和Beclin 1蛋白表达水平;Nissl染色计数脊髓运动神经元.结果 免疫组织化学检测结果显示:3月龄AD小鼠脑内无明显淀粉样斑块沉积,8月龄时皮层和海马出现大量斑块,11月龄时斑块数量明显增多;AD小鼠脊髓腰段运动神经元内存在淀粉样蛋白,但未检测到细胞外斑块沉积.激光共聚焦显微镜观察结果显示;8月龄AD小鼠大脑皮层LC3阳性自噬小泡数量多于对照小鼠;3月龄AD小鼠脊髓运动神经元内存在LC3阳性自噬小泡,自噬小泡数量在8月龄和11月龄时明显增多.Western blotting结果显示:与8月龄对照小鼠比较,8月龄AD小鼠脑组织LC3-Ⅱ蛋白表达升高(P<0.01),脑组织Beclin 1 蛋白表达降低(P<0.05),脊髓LC3-Ⅱ蛋白表达升高(P<0.05),脊髓Beclin 1蛋白表达水平无明显变化(P>0.05).Nissl染色结果显示:与8月龄对照小鼠比较,8月龄AD小鼠脊髓腰段运动神经元数量无明显变化(P>0.05).结论 AD小鼠大脑和脊髓存在自噬改变,自噬水平的变化可能与细胞内淀粉样蛋白有关.
目的 研究阿爾茨海默病(AD)小鼠大腦和脊髓自噬變化情況.方法 分離3月、8月和11月齡AD小鼠和同齡正常對照小鼠(n=6)的大腦和脊髓,左側半腦和脊髓腰段用于組織切片的製備,右側半腦及剩餘脊髓用于提取蛋白.採用免疫組織化學方法觀察腦內和脊髓澱粉樣斑塊;激光共聚焦顯微鏡觀察自噬指標LC3在腦內和脊髓運動神經元中的分佈情況;Westernblotting檢測8月齡小鼠大腦及脊髓LC3-Ⅱ和Beclin 1蛋白錶達水平;Nissl染色計數脊髓運動神經元.結果 免疫組織化學檢測結果顯示:3月齡AD小鼠腦內無明顯澱粉樣斑塊沉積,8月齡時皮層和海馬齣現大量斑塊,11月齡時斑塊數量明顯增多;AD小鼠脊髓腰段運動神經元內存在澱粉樣蛋白,但未檢測到細胞外斑塊沉積.激光共聚焦顯微鏡觀察結果顯示;8月齡AD小鼠大腦皮層LC3暘性自噬小泡數量多于對照小鼠;3月齡AD小鼠脊髓運動神經元內存在LC3暘性自噬小泡,自噬小泡數量在8月齡和11月齡時明顯增多.Western blotting結果顯示:與8月齡對照小鼠比較,8月齡AD小鼠腦組織LC3-Ⅱ蛋白錶達升高(P<0.01),腦組織Beclin 1 蛋白錶達降低(P<0.05),脊髓LC3-Ⅱ蛋白錶達升高(P<0.05),脊髓Beclin 1蛋白錶達水平無明顯變化(P>0.05).Nissl染色結果顯示:與8月齡對照小鼠比較,8月齡AD小鼠脊髓腰段運動神經元數量無明顯變化(P>0.05).結論 AD小鼠大腦和脊髓存在自噬改變,自噬水平的變化可能與細胞內澱粉樣蛋白有關.
목적 연구아이자해묵병(AD)소서대뇌화척수자서변화정황.방법 분리3월、8월화11월령AD소서화동령정상대조소서(n=6)적대뇌화척수,좌측반뇌화척수요단용우조직절편적제비,우측반뇌급잉여척수용우제취단백.채용면역조직화학방법관찰뇌내화척수정분양반괴;격광공취초현미경관찰자서지표LC3재뇌내화척수운동신경원중적분포정황;Westernblotting검측8월령소서대뇌급척수LC3-Ⅱ화Beclin 1단백표체수평;Nissl염색계수척수운동신경원.결과 면역조직화학검측결과현시:3월령AD소서뇌내무명현정분양반괴침적,8월령시피층화해마출현대량반괴,11월령시반괴수량명현증다;AD소서척수요단운동신경원내존재정분양단백,단미검측도세포외반괴침적.격광공취초현미경관찰결과현시;8월령AD소서대뇌피층LC3양성자서소포수량다우대조소서;3월령AD소서척수운동신경원내존재LC3양성자서소포,자서소포수량재8월령화11월령시명현증다.Western blotting결과현시:여8월령대조소서비교,8월령AD소서뇌조직LC3-Ⅱ단백표체승고(P<0.01),뇌조직Beclin 1 단백표체강저(P<0.05),척수LC3-Ⅱ단백표체승고(P<0.05),척수Beclin 1단백표체수평무명현변화(P>0.05).Nissl염색결과현시:여8월령대조소서비교,8월령AD소서척수요단운동신경원수량무명현변화(P>0.05).결론 AD소서대뇌화척수존재자서개변,자서수평적변화가능여세포내정분양단백유관.