复旦学报(自然科学版)
複旦學報(自然科學版)
복단학보(자연과학판)
JOURNAL OF FUDAN UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
2004年
2期
225-229
,共5页
赵惠芳%丁德荣%马中华%蒯本科
趙惠芳%丁德榮%馬中華%蒯本科
조혜방%정덕영%마중화%괴본과
水稻%抑制差减杂交%烯丙异噻唑%稻瘟病%系统获得性抗性
水稻%抑製差減雜交%烯丙異噻唑%稻瘟病%繫統穫得性抗性
수도%억제차감잡교%희병이새서%도온병%계통획득성항성
烯丙异噻唑(PBZ)处理水稻根能使其产生对稻瘟病的系统获得性抗性,因此在东南亚稻区被广泛用于防治稻瘟病,然而关于其作用的分子机理还知之甚少. 运用抑制差减杂交技术,试图通过分离鉴定受PBZ诱导调控的关键基因,探索其作用的分子机理. 以PBZ处理后的水稻叶片cDNA为目标群体(tester),以未处理水稻叶片cDNA为对照群体(driver),用经过对照cDNA差减的、烯丙异噻唑处理的cDNA群体构建了一个含260个重组子的差减文库. 通过差示筛选鉴定出了26个PBZ诱导水稻特异表达和增强表达的候选克隆. 对26个cDNA克隆进行了双向测序和同源性比较,发现其中3个克隆:rJAB1,rTAB2和蛋白磷酸酯酶2Aδ调节亚基同型物基因,位于抗病相关信号转导途径上,它们与哺乳动物和人类免疫途径上的信号因子有明显相似之处,因此推断可能与诱导抗性有关. 另外8个克隆与已知基因同源性为70%～99%. 经Northern杂交分析,其中rJAB1(编码c-jun激活区结合蛋白1)受烯丙异噻唑和稻瘟菌诱导表达;膜糖蛋白同源基因及肌动蛋白(actin)α1受烯丙异噻唑诱导表达,部分克隆为低丰度转录本.
烯丙異噻唑(PBZ)處理水稻根能使其產生對稻瘟病的繫統穫得性抗性,因此在東南亞稻區被廣汎用于防治稻瘟病,然而關于其作用的分子機理還知之甚少. 運用抑製差減雜交技術,試圖通過分離鑒定受PBZ誘導調控的關鍵基因,探索其作用的分子機理. 以PBZ處理後的水稻葉片cDNA為目標群體(tester),以未處理水稻葉片cDNA為對照群體(driver),用經過對照cDNA差減的、烯丙異噻唑處理的cDNA群體構建瞭一箇含260箇重組子的差減文庫. 通過差示篩選鑒定齣瞭26箇PBZ誘導水稻特異錶達和增彊錶達的候選剋隆. 對26箇cDNA剋隆進行瞭雙嚮測序和同源性比較,髮現其中3箇剋隆:rJAB1,rTAB2和蛋白燐痠酯酶2Aδ調節亞基同型物基因,位于抗病相關信號轉導途徑上,它們與哺乳動物和人類免疫途徑上的信號因子有明顯相似之處,因此推斷可能與誘導抗性有關. 另外8箇剋隆與已知基因同源性為70%～99%. 經Northern雜交分析,其中rJAB1(編碼c-jun激活區結閤蛋白1)受烯丙異噻唑和稻瘟菌誘導錶達;膜糖蛋白同源基因及肌動蛋白(actin)α1受烯丙異噻唑誘導錶達,部分剋隆為低豐度轉錄本.
희병이새서(PBZ)처리수도근능사기산생대도온병적계통획득성항성,인차재동남아도구피엄범용우방치도온병,연이관우기작용적분자궤리환지지심소. 운용억제차감잡교기술,시도통과분리감정수PBZ유도조공적관건기인,탐색기작용적분자궤리. 이PBZ처리후적수도협편cDNA위목표군체(tester),이미처리수도협편cDNA위대조군체(driver),용경과대조cDNA차감적、희병이새서처리적cDNA군체구건료일개함260개중조자적차감문고. 통과차시사선감정출료26개PBZ유도수도특이표체화증강표체적후선극륭. 대26개cDNA극륭진행료쌍향측서화동원성비교,발현기중3개극륭:rJAB1,rTAB2화단백린산지매2Aδ조절아기동형물기인,위우항병상관신호전도도경상,타문여포유동물화인류면역도경상적신호인자유명현상사지처,인차추단가능여유도항성유관. 령외8개극륭여이지기인동원성위70%～99%. 경Northern잡교분석,기중rJAB1(편마c-jun격활구결합단백1)수희병이새서화도온균유도표체;막당단백동원기인급기동단백(actin)α1수희병이새서유도표체,부분극륭위저봉도전록본.
