高技术通讯
高技術通訊
고기술통신
HIGH TECHNOLOGY LETTERS
2004年
11期
32-37
,共6页
PCR%cDNA文库%基因组文库%克隆%排除法
PCR%cDNA文庫%基因組文庫%剋隆%排除法
PCR%cDNA문고%기인조문고%극륭%배제법
提出一种改进的基于PCR技术的cDNA和genome文库筛选新方法.该方法利用PCR手段逐步排除文库中的非阳性克隆组分,提高阳性克隆所占比重,最后得到含有一定数量阳性单克隆的最小克隆群体用于直接挑选单个阳性克隆.在筛选cDNA文库时则增加了一个将噬菌体文库转化成质粒文库的步骤.该方法既保留了常规PCR文库筛选方法的灵敏、快捷和经济的特点,又弥补了其筛选周期相对较长、工作量大,以及随着循环数的增加和提取DNA的难度加大,阳性克隆容易丢失等缺陷,尤其在用于筛选cDNA文库时更是免除了繁琐的滴度、侵染和洗脱过程,极大地提高了筛选的成功率.
提齣一種改進的基于PCR技術的cDNA和genome文庫篩選新方法.該方法利用PCR手段逐步排除文庫中的非暘性剋隆組分,提高暘性剋隆所佔比重,最後得到含有一定數量暘性單剋隆的最小剋隆群體用于直接挑選單箇暘性剋隆.在篩選cDNA文庫時則增加瞭一箇將噬菌體文庫轉化成質粒文庫的步驟.該方法既保留瞭常規PCR文庫篩選方法的靈敏、快捷和經濟的特點,又瀰補瞭其篩選週期相對較長、工作量大,以及隨著循環數的增加和提取DNA的難度加大,暘性剋隆容易丟失等缺陷,尤其在用于篩選cDNA文庫時更是免除瞭繁瑣的滴度、侵染和洗脫過程,極大地提高瞭篩選的成功率.
제출일충개진적기우PCR기술적cDNA화genome문고사선신방법.해방법이용PCR수단축보배제문고중적비양성극륭조분,제고양성극륭소점비중,최후득도함유일정수량양성단극륭적최소극륭군체용우직접도선단개양성극륭.재사선cDNA문고시칙증가료일개장서균체문고전화성질립문고적보취.해방법기보류료상규PCR문고사선방법적령민、쾌첩화경제적특점,우미보료기사선주기상대교장、공작량대,이급수착순배수적증가화제취DNA적난도가대,양성극륭용역주실등결함,우기재용우사선cDNA문고시경시면제료번쇄적적도、침염화세탈과정,겁대지제고료사선적성공솔.
