CAJ | 학술논문

目的了解内毒素(LPS)刺激活化人脐静脉内皮细胞(HUVEC)后,与免疫相关的膜分子和细胞因子表达及变化情况,以探讨LPS激活内皮细胞后对免疫应答可能的影响.方法胰蛋白酶法分离培养人脐静脉内皮细胞,用RT-PCR观测未刺激和用LPS刺激的内皮细胞HLA-DR,CD80、CD86、B7-H1、B7-H2、B7-H3、B7-H4、B7-DC、HVEM、TR6、LTβR、LIGHT、OX40、OX40L等免疫相关分子的mRNA表达情况;用流式细胞仪技术检测CD40、CD137、ICAM-1蛋白的表达情况;ELISA检测细胞因子IL-6、IL-8、TNF-α、IFN-γ的含量.结果①RT-PCR结果显示,未经刺激的人脐静脉内皮细胞表达B7-H2、B7-H3、TR6、LTβR,并在LPS刺激后表达上调;B7-DC、HUVEM虽呈组成性表达,但在LPS刺激后未见变化;B7-H1、B7-H4仅在内皮细胞上为诱导表达;而CD80、CD86、LIGHT、HLA-DR、OX40无论刺激与否均未表达.②流式细胞仪检测证实其细胞表面表达少量CD137、CD40及ICAM-1,LPS刺激后其表达水平明显提高;③ELISA检测发现,内皮细胞在未激活状态下就能够分泌IL-6、IL-8和TNF-α,且LPS刺激后提高其分泌量.结论人脐静脉内皮细胞组成性表达多种免疫相关分子,LPS激活内皮细胞可以显著上调其表达.人脐静脉内皮细胞由于缺少CD80、CD86的共刺激信号,不能活化初始T细胞而只能向活化及记忆性T细胞提供共刺激信号在调节特异性免疫应答的过程中,可能会起到负调控的作用.
목적료해내독소(LPS)자격활화인제정맥내피세포(HUVEC)후,여면역상관적막분자화세포인자표체급변화정황,이탐토LPS격활내피세포후대면역응답가능적영향.방법이단백매법분리배양인제정맥내피세포,용RT-PCR관측미자격화용LPS자격적내피세포HLA-DR,CD80、CD86、B7-H1、B7-H2、B7-H3、B7-H4、B7-DC、HVEM、TR6、LTβR、LIGHT、OX40、OX40L등면역상관분자적mRNA표체정황;용류식세포의기술검측CD40、CD137、ICAM-1단백적표체정황;ELISA검측세포인자IL-6、IL-8、TNF-α、IFN-γ적함량.결과①RT-PCR결과현시,미경자격적인제정맥내피세포표체B7-H2、B7-H3、TR6、LTβR,병재LPS자격후표체상조;B7-DC、HUVEM수정조성성표체,단재LPS자격후미견변화;B7-H1、B7-H4부재내피세포상위유도표체;이CD80、CD86、LIGHT、HLA-DR、OX40무론자격여부균미표체.②류식세포의검측증실기세포표면표체소량CD137、CD40급ICAM-1,LPS자격후기표체수평명현제고;③ELISA검측발현,내피세포재미격활상태하취능구분비IL-6、IL-8화TNF-α,차LPS자격후제고기분비량.결론인제정맥내피세포조성성표체다충면역상관분자,LPS격활내피세포가이현저상조기표체.인제정맥내피세포유우결소CD80、CD86적공자격신호,불능활화초시T세포이지능향활화급기억성T세포제공공자격신호재조절특이성면역응답적과정중,가능회기도부조공적작용.