第四军医大学学报
第四軍醫大學學報
제사군의대학학보
JOURNAL OF THE FOURTH MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2007年
3期
197-200
,共4页
张燕%王保莉%苏金%车红磊%于江天%刘新平
張燕%王保莉%囌金%車紅磊%于江天%劉新平
장연%왕보리%소금%차홍뢰%우강천%류신평
盘状结构域受体2%Fc%DS区域%融合表达
盤狀結構域受體2%Fc%DS區域%融閤錶達
반상결구역수체2%Fc%DS구역%융합표체
目的:构建DDR2/Fc真核表达载体,使其在HEK293细胞中进行表达. 方法:采用PCR技术,分别从大鼠脑组织、含人IgG1 Fc全长互补DNA(cDNA)的质粒中扩增出盘状结构域受体2(DDR2)的DS区域、Fc段,以定向克隆的方法将其串联至真核表达载体pcDNA3.1(-)中,获得重组表达载体DDR2/Fc-pcDNA3.1(-);采用脂质体转染技术转染HEK293细胞; RT-PCR、免疫印迹检测融和蛋白的表达. 结果:DNA测序和限制型酶切鉴定证明两段基因正确克隆至pcDNA3.1(-)的多克隆位点,细胞裂解物中检测到融合蛋白的表达,其分子质量与预期大小一致,该融合蛋白能正确表达于HEK293细胞中. 结论:成功构建了DDR2/Fc融和表达载体,表达了融合蛋白.
目的:構建DDR2/Fc真覈錶達載體,使其在HEK293細胞中進行錶達. 方法:採用PCR技術,分彆從大鼠腦組織、含人IgG1 Fc全長互補DNA(cDNA)的質粒中擴增齣盤狀結構域受體2(DDR2)的DS區域、Fc段,以定嚮剋隆的方法將其串聯至真覈錶達載體pcDNA3.1(-)中,穫得重組錶達載體DDR2/Fc-pcDNA3.1(-);採用脂質體轉染技術轉染HEK293細胞; RT-PCR、免疫印跡檢測融和蛋白的錶達. 結果:DNA測序和限製型酶切鑒定證明兩段基因正確剋隆至pcDNA3.1(-)的多剋隆位點,細胞裂解物中檢測到融閤蛋白的錶達,其分子質量與預期大小一緻,該融閤蛋白能正確錶達于HEK293細胞中. 結論:成功構建瞭DDR2/Fc融和錶達載體,錶達瞭融閤蛋白.
목적:구건DDR2/Fc진핵표체재체,사기재HEK293세포중진행표체. 방법:채용PCR기술,분별종대서뇌조직、함인IgG1 Fc전장호보DNA(cDNA)적질립중확증출반상결구역수체2(DDR2)적DS구역、Fc단,이정향극륭적방법장기천련지진핵표체재체pcDNA3.1(-)중,획득중조표체재체DDR2/Fc-pcDNA3.1(-);채용지질체전염기술전염HEK293세포; RT-PCR、면역인적검측융화단백적표체. 결과:DNA측서화한제형매절감정증명량단기인정학극륭지pcDNA3.1(-)적다극륭위점,세포렬해물중검측도융합단백적표체,기분자질량여예기대소일치,해융합단백능정학표체우HEK293세포중. 결론:성공구건료DDR2/Fc융화표체재체,표체료융합단백.
