生态科学
生態科學
생태과학
ECOLOGIC SCIENCE
2008年
6期
468-473
,共6页
刘宇庆%吕慎金%殷宝法%范红梅%刘燕%魏万红
劉宇慶%呂慎金%慇寶法%範紅梅%劉燕%魏萬紅
류우경%려신금%은보법%범홍매%류연%위만홍
狗獾%粪便DNA%提取%PCR扩增
狗獾%糞便DNA%提取%PCR擴增
구환%분편DNA%제취%PCR확증
在京杭大运河扬州段堤坝上采集狗獾的新鲜粪便,采用预处理-酚/氯仿抽提法、NaCl改良法、异硫氰酸胍裂解法、淀粉吸附法及QIAamp试剂盒法5种方法对粪便样品中狗獾DNA进行提取,探讨狗獾粪便样品中DNA提取方法和优化条件.结果表明,在5种提取方法中,淀粉吸附法的效果明显优于其它4种方法.采用粪便裂解液快速裂解细胞后,加入淀粉去除其中的大量PCR抑制物,然后用蛋白酶K裂解、酚/氯仿/异戊醇抽提,最后使用UNIQ-10柱纯化粪便DNA,对线粒体控制区和微卫星位点的PCR扩增反应及测序结果证实该方法的可行性.以上结果表明,通过该方法获得的粪便DNA能够用于更深入的分子遗传学等学科的研究.
在京杭大運河颺州段隄壩上採集狗獾的新鮮糞便,採用預處理-酚/氯倣抽提法、NaCl改良法、異硫氰痠胍裂解法、澱粉吸附法及QIAamp試劑盒法5種方法對糞便樣品中狗獾DNA進行提取,探討狗獾糞便樣品中DNA提取方法和優化條件.結果錶明,在5種提取方法中,澱粉吸附法的效果明顯優于其它4種方法.採用糞便裂解液快速裂解細胞後,加入澱粉去除其中的大量PCR抑製物,然後用蛋白酶K裂解、酚/氯倣/異戊醇抽提,最後使用UNIQ-10柱純化糞便DNA,對線粒體控製區和微衛星位點的PCR擴增反應及測序結果證實該方法的可行性.以上結果錶明,通過該方法穫得的糞便DNA能夠用于更深入的分子遺傳學等學科的研究.
재경항대운하양주단제패상채집구환적신선분편,채용예처리-분/록방추제법、NaCl개량법、이류청산고렬해법、정분흡부법급QIAamp시제합법5충방법대분편양품중구환DNA진행제취,탐토구환분편양품중DNA제취방법화우화조건.결과표명,재5충제취방법중,정분흡부법적효과명현우우기타4충방법.채용분편렬해액쾌속렬해세포후,가입정분거제기중적대량PCR억제물,연후용단백매K렬해、분/록방/이무순추제,최후사용UNIQ-10주순화분편DNA,대선립체공제구화미위성위점적PCR확증반응급측서결과증실해방법적가행성.이상결과표명,통과해방법획득적분편DNA능구용우경심입적분자유전학등학과적연구.
