浙江大学学报(农业与生命科学版)
浙江大學學報(農業與生命科學版)
절강대학학보(농업여생명과학판)
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY(AGRICULTURE & LIFE SCIENCES)
2012年
1期
28-34
,共7页
陈晓耀%王伟%王政逸%陈卫良
陳曉耀%王偉%王政逸%陳衛良
진효요%왕위%왕정일%진위량
水稻纹枯病菌%菌核形成%cDNA文库%抑制消减杂交
水稻紋枯病菌%菌覈形成%cDNA文庫%抑製消減雜交
수도문고병균%균핵형성%cDNA문고%억제소감잡교
以水稻纹枯病GD-118菌株菌丝形成期的mRNA为驱赶子(driver),以菌核形成期的mRNA为检测子(tester),采用抑制消减杂交(SSH)结合虚拟Northern杂交筛选,构建了水稻纹枯病菌菌核形成过程中特异表达产生的差减cDNA文库;进一步用PCR筛选显示克隆中插入的片段主要分布在200~500 bp之间;随机挑取克隆应用虚拟Northern技术以菌丝、菌核cDNA为探针来验证消减有效性,经测序和同源性检测剔除重复序列之后,获得了从菌丝到菌核形成相关的28条特异表达的基因片段;所筛选的特异表达序列主要涉及胁迫响应、转录调控、信号传导、合成代谢等.这为进一步分析水稻纹枯病菌菌核形成过程的相关基因提供了科学线索.
以水稻紋枯病GD-118菌株菌絲形成期的mRNA為驅趕子(driver),以菌覈形成期的mRNA為檢測子(tester),採用抑製消減雜交(SSH)結閤虛擬Northern雜交篩選,構建瞭水稻紋枯病菌菌覈形成過程中特異錶達產生的差減cDNA文庫;進一步用PCR篩選顯示剋隆中插入的片段主要分佈在200~500 bp之間;隨機挑取剋隆應用虛擬Northern技術以菌絲、菌覈cDNA為探針來驗證消減有效性,經測序和同源性檢測剔除重複序列之後,穫得瞭從菌絲到菌覈形成相關的28條特異錶達的基因片段;所篩選的特異錶達序列主要涉及脅迫響應、轉錄調控、信號傳導、閤成代謝等.這為進一步分析水稻紋枯病菌菌覈形成過程的相關基因提供瞭科學線索.
이수도문고병GD-118균주균사형성기적mRNA위구간자(driver),이균핵형성기적mRNA위검측자(tester),채용억제소감잡교(SSH)결합허의Northern잡교사선,구건료수도문고병균균핵형성과정중특이표체산생적차감cDNA문고;진일보용PCR사선현시극륭중삽입적편단주요분포재200~500 bp지간;수궤도취극륭응용허의Northern기술이균사、균핵cDNA위탐침래험증소감유효성,경측서화동원성검측척제중복서렬지후,획득료종균사도균핵형성상관적28조특이표체적기인편단;소사선적특이표체서렬주요섭급협박향응、전록조공、신호전도、합성대사등.저위진일보분석수도문고병균균핵형성과정적상관기인제공료과학선색.