农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2006年
2期
151-155
,共5页
猪%脂蛋白脂酶(LPL)基因%肠系膜脂肪%RT-PCR
豬%脂蛋白脂酶(LPL)基因%腸繫膜脂肪%RT-PCR
저%지단백지매(LPL)기인%장계막지방%RT-PCR
从杜长大母猪的肠系膜脂肪中提取基因组RNA,用RT-PCR扩增脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase LPL)基因,获得1条约689bp的片段,以pGEM-T Easy vector为载体,将该基因片段克隆到大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α中.从筛选的阳性克隆中分离出LPL基因,测定其序列.分析表明,该片段为LPLcDNA的部分序列,编码229个氨基酸组成的多肽.研究得到的基因片段与报道的猪脂肪组织中LPLcDNA部分序列同源性达到98%,氨基酸序列同源性达到99.1%.以LPL基因片段的克隆为基础,构建了优化的半定量RT-PCR法,以β-actin为内标,研究不同体重猪脂肪组织LPL基因表达的差异.结果发现,从刚出生到30kg,LPL基因表达呈上升趋势,在30～50 kg,LPL基因表达呈下降趋势,50～90kg ,LPL基因表达又呈上升趋势.
從杜長大母豬的腸繫膜脂肪中提取基因組RNA,用RT-PCR擴增脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase LPL)基因,穫得1條約689bp的片段,以pGEM-T Easy vector為載體,將該基因片段剋隆到大腸桿菌(Escherichia coli)DH5α中.從篩選的暘性剋隆中分離齣LPL基因,測定其序列.分析錶明,該片段為LPLcDNA的部分序列,編碼229箇氨基痠組成的多肽.研究得到的基因片段與報道的豬脂肪組織中LPLcDNA部分序列同源性達到98%,氨基痠序列同源性達到99.1%.以LPL基因片段的剋隆為基礎,構建瞭優化的半定量RT-PCR法,以β-actin為內標,研究不同體重豬脂肪組織LPL基因錶達的差異.結果髮現,從剛齣生到30kg,LPL基因錶達呈上升趨勢,在30～50 kg,LPL基因錶達呈下降趨勢,50～90kg ,LPL基因錶達又呈上升趨勢.
종두장대모저적장계막지방중제취기인조RNA,용RT-PCR확증지단백지매(lipoprotein lipase LPL)기인,획득1조약689bp적편단,이pGEM-T Easy vector위재체,장해기인편단극륭도대장간균(Escherichia coli)DH5α중.종사선적양성극륭중분리출LPL기인,측정기서렬.분석표명,해편단위LPLcDNA적부분서렬,편마229개안기산조성적다태.연구득도적기인편단여보도적저지방조직중LPLcDNA부분서렬동원성체도98%,안기산서렬동원성체도99.1%.이LPL기인편단적극륭위기출,구건료우화적반정량RT-PCR법,이β-actin위내표,연구불동체중저지방조직LPL기인표체적차이.결과발현,종강출생도30kg,LPL기인표체정상승추세,재30～50 kg,LPL기인표체정하강추세,50～90kg ,LPL기인표체우정상승추세.
