农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2006年
3期
376-380
,共5页
刘卫群%王永亮%赵同金%周海梦%郭蔼光
劉衛群%王永亮%趙同金%週海夢%郭藹光
류위군%왕영량%조동금%주해몽%곽애광
烟草%DREB%克隆%酵母单杂交%反式激活
煙草%DREB%剋隆%酵母單雜交%反式激活
연초%DREB%극륭%효모단잡교%반식격활
在NCBI网站BLAST得到5个烟草表达序列标签(EST),据此设计引物,从烟草(Nicotiana benthamiana)品种本塞母氏中分离出2条DREB(dehydration-responsive element binding protein)-like转录因子基因,分别命名为NbDREB1和NbDREB2.与相关AP2/EREBP类转录因子比对结果显示,NbDREB1和NbDREB2都具有典型的AP2/EREBP转录因子家族EREBP亚族A类AP2区特征,并且都能在大肠杆菌(Escherichia coli)中表达.酵母单杂交结果显示,都不具有激活功能.连接pGADT7反式激活载体进行酵母单杂交结果显示:NbDREB1能与DRE顺式作用元件结合,NbDREB2则不能,表明NbDREB1为抑制型DREB类转录因子.比较NbDREB1和NbDREB2的AP2区发现:两者在第2位和第49位氨基酸处不同,NbDREB1为Y和K,NbDREB2为N和R.
在NCBI網站BLAST得到5箇煙草錶達序列標籤(EST),據此設計引物,從煙草(Nicotiana benthamiana)品種本塞母氏中分離齣2條DREB(dehydration-responsive element binding protein)-like轉錄因子基因,分彆命名為NbDREB1和NbDREB2.與相關AP2/EREBP類轉錄因子比對結果顯示,NbDREB1和NbDREB2都具有典型的AP2/EREBP轉錄因子傢族EREBP亞族A類AP2區特徵,併且都能在大腸桿菌(Escherichia coli)中錶達.酵母單雜交結果顯示,都不具有激活功能.連接pGADT7反式激活載體進行酵母單雜交結果顯示:NbDREB1能與DRE順式作用元件結閤,NbDREB2則不能,錶明NbDREB1為抑製型DREB類轉錄因子.比較NbDREB1和NbDREB2的AP2區髮現:兩者在第2位和第49位氨基痠處不同,NbDREB1為Y和K,NbDREB2為N和R.
재NCBI망참BLAST득도5개연초표체서렬표첨(EST),거차설계인물,종연초(Nicotiana benthamiana)품충본새모씨중분리출2조DREB(dehydration-responsive element binding protein)-like전록인자기인,분별명명위NbDREB1화NbDREB2.여상관AP2/EREBP류전록인자비대결과현시,NbDREB1화NbDREB2도구유전형적AP2/EREBP전록인자가족EREBP아족A류AP2구특정,병차도능재대장간균(Escherichia coli)중표체.효모단잡교결과현시,도불구유격활공능.련접pGADT7반식격활재체진행효모단잡교결과현시:NbDREB1능여DRE순식작용원건결합,NbDREB2칙불능,표명NbDREB1위억제형DREB류전록인자.비교NbDREB1화NbDREB2적AP2구발현:량자재제2위화제49위안기산처불동,NbDREB1위Y화K,NbDREB2위N화R.