中国中医药信息杂志
中國中醫藥信息雜誌
중국중의약신식잡지
CHINESE JOURNAL OF INFORMATION ON TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
2006年
9期
43-45
,共3页
刘燕南%金永三%刘震%韩宇宁
劉燕南%金永三%劉震%韓宇寧
류연남%금영삼%류진%한우저
冬虫夏草%cDNA文库%构建
鼕蟲夏草%cDNA文庫%構建
동충하초%cDNA문고%구건
目的 分别构建冬虫夏草子座和虫体部分的cDNA文库.方法 裂解法提取总RNA,磁珠法分离mRNA,反转录合成双链cDNA,末端补平,连接EcoR Ⅰ并磷酸化,胶回收目的片断,连接载体pBluescriptⅡ SK(+)XR并电转化感受态细胞DH10B,测定文库的克隆数、重组率,PCR测定插入片断大小.结果 所建文库库容量分别为:子座部分1.0×106克隆、虫体部分1.28 × 106克隆;重组率分别为:子座部分87.5%、虫体部分68.75%,片段的大小范围均在0.5～2 kb之间.结论 分别构建了野生冬虫夏草子座和虫体部分的cDNA文库.
目的 分彆構建鼕蟲夏草子座和蟲體部分的cDNA文庫.方法 裂解法提取總RNA,磁珠法分離mRNA,反轉錄閤成雙鏈cDNA,末耑補平,連接EcoR Ⅰ併燐痠化,膠迴收目的片斷,連接載體pBluescriptⅡ SK(+)XR併電轉化感受態細胞DH10B,測定文庫的剋隆數、重組率,PCR測定插入片斷大小.結果 所建文庫庫容量分彆為:子座部分1.0×106剋隆、蟲體部分1.28 × 106剋隆;重組率分彆為:子座部分87.5%、蟲體部分68.75%,片段的大小範圍均在0.5～2 kb之間.結論 分彆構建瞭野生鼕蟲夏草子座和蟲體部分的cDNA文庫.
목적 분별구건동충하초자좌화충체부분적cDNA문고.방법 렬해법제취총RNA,자주법분리mRNA,반전록합성쌍련cDNA,말단보평,련접EcoR Ⅰ병린산화,효회수목적편단,련접재체pBluescriptⅡ SK(+)XR병전전화감수태세포DH10B,측정문고적극륭수、중조솔,PCR측정삽입편단대소.결과 소건문고고용량분별위:자좌부분1.0×106극륭、충체부분1.28 × 106극륭;중조솔분별위:자좌부분87.5%、충체부분68.75%,편단적대소범위균재0.5～2 kb지간.결론 분별구건료야생동충하초자좌화충체부분적cDNA문고.
