军事医学科学院院刊
軍事醫學科學院院刊
군사의학과학원원간
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2007年
3期
243-245,261
,共4页
李丽艳%朱捷%邢瑞云%付汉江%姜秀云%郑晓飞
李麗豔%硃捷%邢瑞雲%付漢江%薑秀雲%鄭曉飛
리려염%주첩%형서운%부한강%강수운%정효비
盐酸克仑特罗%酶联免疫吸附测定%抗体,单克隆%杂交瘤
鹽痠剋崙特囉%酶聯免疫吸附測定%抗體,單剋隆%雜交瘤
염산극륜특라%매련면역흡부측정%항체,단극륭%잡교류
目的:制备抗盐酸克仑特罗(clenbuterol ,CL)的单克隆抗体并进行免疫学特性鉴定.方法:用重氮化法将盐酸克仑特罗偶联于载体牛血清白蛋白(BSA),形成的结合抗原BSA-CL作为免疫原免疫BALB/c小鼠,同时将CL与卵清白蛋白(OVA)偶联制备检测原(OVA-CL).应用杂交瘤技术建立分泌抗盐酸克仑特罗单克隆抗体的杂交瘤细胞株,体内诱生腹水并进行纯化.用竞争性ELISA法测定抗体的亲和常数及交叉反应性.结果及结论:获得了18株稳定分泌抗盐酸克仑特罗单克隆抗体的杂交瘤细胞株,挑选其中E9-C11、C11-E3、E7-G8三株高亲和力的细胞株进行免疫学特性鉴定.三株抗体的亚类均为IgG1.细胞上清的间接ELISA效价分别为1:1 280、1:1 000、1:800,三株腹水效价都约为1×10-6.亲和常数分别为2.4×10-8mol/L、2.83×10 -8 mol/L 、3.28×10-8 mol/L .E9-C11单抗对CL的IC50为6.1035μg/L;对沙丁胺醇的IC50大于781.25 μg/L,交叉反应性小于0.78%;对肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素、莱克多巴胺及部分维生素和抗生素均无交叉反应性.蛋白免疫印迹分析证明三株单抗特异性均很高,可用于与其相关的免疫检测或应用研究.
目的:製備抗鹽痠剋崙特囉(clenbuterol ,CL)的單剋隆抗體併進行免疫學特性鑒定.方法:用重氮化法將鹽痠剋崙特囉偶聯于載體牛血清白蛋白(BSA),形成的結閤抗原BSA-CL作為免疫原免疫BALB/c小鼠,同時將CL與卵清白蛋白(OVA)偶聯製備檢測原(OVA-CL).應用雜交瘤技術建立分泌抗鹽痠剋崙特囉單剋隆抗體的雜交瘤細胞株,體內誘生腹水併進行純化.用競爭性ELISA法測定抗體的親和常數及交扠反應性.結果及結論:穫得瞭18株穩定分泌抗鹽痠剋崙特囉單剋隆抗體的雜交瘤細胞株,挑選其中E9-C11、C11-E3、E7-G8三株高親和力的細胞株進行免疫學特性鑒定.三株抗體的亞類均為IgG1.細胞上清的間接ELISA效價分彆為1:1 280、1:1 000、1:800,三株腹水效價都約為1×10-6.親和常數分彆為2.4×10-8mol/L、2.83×10 -8 mol/L 、3.28×10-8 mol/L .E9-C11單抗對CL的IC50為6.1035μg/L;對沙丁胺醇的IC50大于781.25 μg/L,交扠反應性小于0.78%;對腎上腺素、去甲腎上腺素、異丙腎上腺素、萊剋多巴胺及部分維生素和抗生素均無交扠反應性.蛋白免疫印跡分析證明三株單抗特異性均很高,可用于與其相關的免疫檢測或應用研究.
목적:제비항염산극륜특라(clenbuterol ,CL)적단극륭항체병진행면역학특성감정.방법:용중담화법장염산극륜특라우련우재체우혈청백단백(BSA),형성적결합항원BSA-CL작위면역원면역BALB/c소서,동시장CL여란청백단백(OVA)우련제비검측원(OVA-CL).응용잡교류기술건립분비항염산극륜특라단극륭항체적잡교류세포주,체내유생복수병진행순화.용경쟁성ELISA법측정항체적친화상수급교차반응성.결과급결론:획득료18주은정분비항염산극륜특라단극륭항체적잡교류세포주,도선기중E9-C11、C11-E3、E7-G8삼주고친화력적세포주진행면역학특성감정.삼주항체적아류균위IgG1.세포상청적간접ELISA효개분별위1:1 280、1:1 000、1:800,삼주복수효개도약위1×10-6.친화상수분별위2.4×10-8mol/L、2.83×10 -8 mol/L 、3.28×10-8 mol/L .E9-C11단항대CL적IC50위6.1035μg/L;대사정알순적IC50대우781.25 μg/L,교차반응성소우0.78%;대신상선소、거갑신상선소、이병신상선소、래극다파알급부분유생소화항생소균무교차반응성.단백면역인적분석증명삼주단항특이성균흔고,가용우여기상관적면역검측혹응용연구.
