应用与环境生物学报
應用與環境生物學報
응용여배경생물학보
CHINESE JOURNAL OF APPLIED & ENVIRONMENTAL BIOLOGY
2008年
6期
783-786
,共4页
刘燕燕%王新颖%孙华钦%卢亦路%曾梅%陶大昌%刘运强%马用信
劉燕燕%王新穎%孫華欽%盧亦路%曾梅%陶大昌%劉運彊%馬用信
류연연%왕신영%손화흠%로역로%증매%도대창%류운강%마용신
Tcp11l1摹因%亚细胞定位%表达分析%跨膜分析
Tcp11l1摹因%亞細胞定位%錶達分析%跨膜分析
Tcp11l1모인%아세포정위%표체분석%과막분석
为了分析鼠Tcp11l1基因的结构和表达,从小鼠睾丸组织总cDNA中扩增鼠Tcp11l1基因的开读框架(Open reading frame,ORF),定向克隆到真核表达载体pEGFP-N1,构建融合表达质粒pTcp11l1-EGFP,转染HEK293细胞,荧光显微镜下观察Tcp11l1基因的亚细胞定位;设计跨小鼠Tcp11l1基因两个外显子的引物,RT-PCR分析此基因在小鼠各组织中的表达情况.并利用生物信息学的方法对鼠Tcp11l1基因的结构进行初步预测.转染pTcp11l1-EGFP后在胞质中能明显看到绿色荧光信号,而在胞核和胞膜中无绿色荧光信号,表明鼠Tcp11l1蛋白定位于细胞质;RT-PCR分析结果表明,鼠Tcp11l1基因在小鼠各组织中广泛表达.生物信息学结果表明,鼠Tcp11l1和鼠Tcp11的蛋白具有相同的TCP11结构域,不能确定是否存在跨膜序列.鼠Tcp11l1基因和鼠Tcp11基因具有相似的亚细胞定位和TCP11结构域,表明这两个基因可能具有相似的受体功能.但是与Tcp11特异表达于睾丸组织的延长精细胞和精子不同,Tcp11l1为广泛表达,说明Tcp11l1可能在多种组织细胞中发挥作用.
為瞭分析鼠Tcp11l1基因的結構和錶達,從小鼠睪汍組織總cDNA中擴增鼠Tcp11l1基因的開讀框架(Open reading frame,ORF),定嚮剋隆到真覈錶達載體pEGFP-N1,構建融閤錶達質粒pTcp11l1-EGFP,轉染HEK293細胞,熒光顯微鏡下觀察Tcp11l1基因的亞細胞定位;設計跨小鼠Tcp11l1基因兩箇外顯子的引物,RT-PCR分析此基因在小鼠各組織中的錶達情況.併利用生物信息學的方法對鼠Tcp11l1基因的結構進行初步預測.轉染pTcp11l1-EGFP後在胞質中能明顯看到綠色熒光信號,而在胞覈和胞膜中無綠色熒光信號,錶明鼠Tcp11l1蛋白定位于細胞質;RT-PCR分析結果錶明,鼠Tcp11l1基因在小鼠各組織中廣汎錶達.生物信息學結果錶明,鼠Tcp11l1和鼠Tcp11的蛋白具有相同的TCP11結構域,不能確定是否存在跨膜序列.鼠Tcp11l1基因和鼠Tcp11基因具有相似的亞細胞定位和TCP11結構域,錶明這兩箇基因可能具有相似的受體功能.但是與Tcp11特異錶達于睪汍組織的延長精細胞和精子不同,Tcp11l1為廣汎錶達,說明Tcp11l1可能在多種組織細胞中髮揮作用.
위료분석서Tcp11l1기인적결구화표체,종소서고환조직총cDNA중확증서Tcp11l1기인적개독광가(Open reading frame,ORF),정향극륭도진핵표체재체pEGFP-N1,구건융합표체질립pTcp11l1-EGFP,전염HEK293세포,형광현미경하관찰Tcp11l1기인적아세포정위;설계과소서Tcp11l1기인량개외현자적인물,RT-PCR분석차기인재소서각조직중적표체정황.병이용생물신식학적방법대서Tcp11l1기인적결구진행초보예측.전염pTcp11l1-EGFP후재포질중능명현간도록색형광신호,이재포핵화포막중무록색형광신호,표명서Tcp11l1단백정위우세포질;RT-PCR분석결과표명,서Tcp11l1기인재소서각조직중엄범표체.생물신식학결과표명,서Tcp11l1화서Tcp11적단백구유상동적TCP11결구역,불능학정시부존재과막서렬.서Tcp11l1기인화서Tcp11기인구유상사적아세포정위화TCP11결구역,표명저량개기인가능구유상사적수체공능.단시여Tcp11특이표체우고환조직적연장정세포화정자불동,Tcp11l1위엄범표체,설명Tcp11l1가능재다충조직세포중발휘작용.
