创伤外科杂志
創傷外科雜誌
창상외과잡지
JOURNAL OF AUMATIC SURGERY
2009年
5期
402-406
,共5页
董叫云%牛轶雯%谢挺%青春%陆树良
董叫雲%牛軼雯%謝挺%青春%陸樹良
동규운%우질문%사정%청춘%륙수량
糖基化终末产物%周期素D1%周期素B1%周期素依赖性激酶4%细胞增殖
糖基化終末產物%週期素D1%週期素B1%週期素依賴性激酶4%細胞增殖
당기화종말산물%주기소D1%주기소B1%주기소의뢰성격매4%세포증식
目的 通过体外试验探讨糖基化终末产物(AGEs)对表皮角质形成细胞周期调控的影响机制.方法 体外培养的人表皮角质形成细胞经AGEs(150mg/ml)作用后,用噻唑兰(MTT)法研究其增殖活力、流式细胞仪研究细胞周期和凋亡率.用小片断RNA干扰(siRNA)的方法阻断细胞中AGEs受体(receptor of AGEs,RAGE)mRNA的表达,realtime PCR鉴定其阻断效率.RT-PCR法检测RAGE阻断前后各组细胞内RAF-1、黏着斑激酶(FAK)、周期素(cyclin)D1、cyclinB1、周期表依赖性激酶4(CDK4)的核酸水平表达差异.结果 经AGEs干预后表皮角质形成细胞增殖活性下降,凋亡率升高,细胞周期G2期的比例显著增高,而细胞周期调控相关因子及信号因子RAF-1、cyclinD1、cyclinB1、CDK4的核酸表达较对照组却明显升高,用RAGE阻断以上因子后表达则与对照组相比无差异.结论 在上述体外模型下,表皮角质形成细胞的周期调控因子升高,而增殖却下降且凋亡增加,可能是AGEs干预后细胞内启动内源性代偿调控机制,且这种调控机制与其受体(RAGE)途径相关;AGEs也可能还通过以上细胞周期调控因子以外的其他途径或机制影响细胞生物学功能.
目的 通過體外試驗探討糖基化終末產物(AGEs)對錶皮角質形成細胞週期調控的影響機製.方法 體外培養的人錶皮角質形成細胞經AGEs(150mg/ml)作用後,用噻唑蘭(MTT)法研究其增殖活力、流式細胞儀研究細胞週期和凋亡率.用小片斷RNA榦擾(siRNA)的方法阻斷細胞中AGEs受體(receptor of AGEs,RAGE)mRNA的錶達,realtime PCR鑒定其阻斷效率.RT-PCR法檢測RAGE阻斷前後各組細胞內RAF-1、黏著斑激酶(FAK)、週期素(cyclin)D1、cyclinB1、週期錶依賴性激酶4(CDK4)的覈痠水平錶達差異.結果 經AGEs榦預後錶皮角質形成細胞增殖活性下降,凋亡率升高,細胞週期G2期的比例顯著增高,而細胞週期調控相關因子及信號因子RAF-1、cyclinD1、cyclinB1、CDK4的覈痠錶達較對照組卻明顯升高,用RAGE阻斷以上因子後錶達則與對照組相比無差異.結論 在上述體外模型下,錶皮角質形成細胞的週期調控因子升高,而增殖卻下降且凋亡增加,可能是AGEs榦預後細胞內啟動內源性代償調控機製,且這種調控機製與其受體(RAGE)途徑相關;AGEs也可能還通過以上細胞週期調控因子以外的其他途徑或機製影響細胞生物學功能.
목적 통과체외시험탐토당기화종말산물(AGEs)대표피각질형성세포주기조공적영향궤제.방법 체외배양적인표피각질형성세포경AGEs(150mg/ml)작용후,용새서란(MTT)법연구기증식활력、류식세포의연구세포주기화조망솔.용소편단RNA간우(siRNA)적방법조단세포중AGEs수체(receptor of AGEs,RAGE)mRNA적표체,realtime PCR감정기조단효솔.RT-PCR법검측RAGE조단전후각조세포내RAF-1、점착반격매(FAK)、주기소(cyclin)D1、cyclinB1、주기표의뢰성격매4(CDK4)적핵산수평표체차이.결과 경AGEs간예후표피각질형성세포증식활성하강,조망솔승고,세포주기G2기적비례현저증고,이세포주기조공상관인자급신호인자RAF-1、cyclinD1、cyclinB1、CDK4적핵산표체교대조조각명현승고,용RAGE조단이상인자후표체칙여대조조상비무차이.결론 재상술체외모형하,표피각질형성세포적주기조공인자승고,이증식각하강차조망증가,가능시AGEs간예후세포내계동내원성대상조공궤제,차저충조공궤제여기수체(RAGE)도경상관;AGEs야가능환통과이상세포주기조공인자이외적기타도경혹궤제영향세포생물학공능.
