中国临床医学
中國臨床醫學
중국림상의학
CLINICAL MEDICAL JOURNAL OF CHINA
2009年
4期
562-565
,共4页
子宫内膜癌%5-杂氮-2′-脱氧胞苷%DNA错配修复基因%甲基化修饰%增殖抑制
子宮內膜癌%5-雜氮-2′-脫氧胞苷%DNA錯配脩複基因%甲基化脩飾%增殖抑製
자궁내막암%5-잡담-2′-탈양포감%DNA착배수복기인%갑기화수식%증식억제
目的:研究在用5-杂氮-2′脱氧胞苷(5-Aza-CdR)诱导体外培养的人子宫内膜癌细胞株HEC-1-A中,DNA错配修复基因hMLH1、hMSH2及细胞周期调控基因p16启动子CpG岛的去甲基化,及对于该细胞的增殖抑制作用.方法:体外培养人子宫内膜癌细胞株HEC-1-A;利用MTT比色法检测5-Aza-CdR对于HEC-1-A的增殖抑制的影响;利用流式细胞术(FCM)分析药物处理前后HEC-1-A的细胞周期;利用重亚硫酸盐处理及甲基化特异性PCR(MS-PCR)检测hMLH1、hMSH2及p16基因启动子CpG岛的甲基化修饰;提取药物处理前后HEC-1-A细胞的总蛋白,利用Western blotting检测hMLH1、hMSH2及p16蛋白的表达情况.结果:5-Aza-CdR对于人子宫内膜癌细胞株HEC-1-A体外增殖抑制呈明显的剂量依赖性[IC50为(0.71±0.05)μmol·L-1];FCM分析显示HEC-1-A细胞在5-Aza-CdR处理前后均呈现明显的细胞周期差异,并且药物组细胞表现为G0/G1期(P<0.05)阻滞.MS-PCR分析5-Aza-CdR显示著诱导hMLH1、hMSH2基因启动子CpG岛的去甲基化修饰.Western blotting检测发现IC50剂量的5-Aza-CdR处理HEC-1-A细胞前后,hMLH1、hMSH2及p16的表达量为(111.30±3.17)%、(76.99±1.19)%和(97.63±1.28)%明显高于空白对照组(P<0.05),提示该药物有提高上述蛋白表达的作用.结论:5-Aza-CdR可诱导人子宫内膜癌细胞株HEC-1-A中,hMLH1、hMSH2及p16启动子CpG岛的去甲基化修饰,从而有效抑制该细胞的体外增殖.
目的:研究在用5-雜氮-2′脫氧胞苷(5-Aza-CdR)誘導體外培養的人子宮內膜癌細胞株HEC-1-A中,DNA錯配脩複基因hMLH1、hMSH2及細胞週期調控基因p16啟動子CpG島的去甲基化,及對于該細胞的增殖抑製作用.方法:體外培養人子宮內膜癌細胞株HEC-1-A;利用MTT比色法檢測5-Aza-CdR對于HEC-1-A的增殖抑製的影響;利用流式細胞術(FCM)分析藥物處理前後HEC-1-A的細胞週期;利用重亞硫痠鹽處理及甲基化特異性PCR(MS-PCR)檢測hMLH1、hMSH2及p16基因啟動子CpG島的甲基化脩飾;提取藥物處理前後HEC-1-A細胞的總蛋白,利用Western blotting檢測hMLH1、hMSH2及p16蛋白的錶達情況.結果:5-Aza-CdR對于人子宮內膜癌細胞株HEC-1-A體外增殖抑製呈明顯的劑量依賴性[IC50為(0.71±0.05)μmol·L-1];FCM分析顯示HEC-1-A細胞在5-Aza-CdR處理前後均呈現明顯的細胞週期差異,併且藥物組細胞錶現為G0/G1期(P<0.05)阻滯.MS-PCR分析5-Aza-CdR顯示著誘導hMLH1、hMSH2基因啟動子CpG島的去甲基化脩飾.Western blotting檢測髮現IC50劑量的5-Aza-CdR處理HEC-1-A細胞前後,hMLH1、hMSH2及p16的錶達量為(111.30±3.17)%、(76.99±1.19)%和(97.63±1.28)%明顯高于空白對照組(P<0.05),提示該藥物有提高上述蛋白錶達的作用.結論:5-Aza-CdR可誘導人子宮內膜癌細胞株HEC-1-A中,hMLH1、hMSH2及p16啟動子CpG島的去甲基化脩飾,從而有效抑製該細胞的體外增殖.
목적:연구재용5-잡담-2′탈양포감(5-Aza-CdR)유도체외배양적인자궁내막암세포주HEC-1-A중,DNA착배수복기인hMLH1、hMSH2급세포주기조공기인p16계동자CpG도적거갑기화,급대우해세포적증식억제작용.방법:체외배양인자궁내막암세포주HEC-1-A;이용MTT비색법검측5-Aza-CdR대우HEC-1-A적증식억제적영향;이용류식세포술(FCM)분석약물처리전후HEC-1-A적세포주기;이용중아류산염처리급갑기화특이성PCR(MS-PCR)검측hMLH1、hMSH2급p16기인계동자CpG도적갑기화수식;제취약물처리전후HEC-1-A세포적총단백,이용Western blotting검측hMLH1、hMSH2급p16단백적표체정황.결과:5-Aza-CdR대우인자궁내막암세포주HEC-1-A체외증식억제정명현적제량의뢰성[IC50위(0.71±0.05)μmol·L-1];FCM분석현시HEC-1-A세포재5-Aza-CdR처리전후균정현명현적세포주기차이,병차약물조세포표현위G0/G1기(P<0.05)조체.MS-PCR분석5-Aza-CdR현시저유도hMLH1、hMSH2기인계동자CpG도적거갑기화수식.Western blotting검측발현IC50제량적5-Aza-CdR처리HEC-1-A세포전후,hMLH1、hMSH2급p16적표체량위(111.30±3.17)%、(76.99±1.19)%화(97.63±1.28)%명현고우공백대조조(P<0.05),제시해약물유제고상술단백표체적작용.결론:5-Aza-CdR가유도인자궁내막암세포주HEC-1-A중,hMLH1、hMSH2급p16계동자CpG도적거갑기화수식,종이유효억제해세포적체외증식.
