生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2011年
5期
713-716
,共4页
陆俭%李萍%马亚茹%陈勇%蒋琳
陸儉%李萍%馬亞茹%陳勇%蔣琳
륙검%리평%마아여%진용%장림
电穿孔法%CHO-dhfr-细胞%正交设计
電穿孔法%CHO-dhfr-細胞%正交設計
전천공법%CHO-dhfr-세포%정교설계
目的:探讨细胞电穿孔转染的优化方法.方法:按照L9(34)正交表安排各因素水平的细胞电敏感性实验,以台盼蓝染色计数确定细胞存活率,最接近50%存活率为最优方案,根据最优方案将CHO-dhfr-细胞与DNA混匀电穿孔转染以验证正交设计结果.结果:CHO-dhfr-细胞电转染的优化参数为低离子强度Tris-Cl缓冲液、750 V/cm、50μF、电击2次、间隔1 min,各因素对转染的影响大小依次为缓冲液、电场强度、脉冲次数、电容.结论:确定了电穿孔法转染CHO-dhfr-细胞的方法,为进一步应用该细胞株表达重组蛋白打下了基础.
目的:探討細胞電穿孔轉染的優化方法.方法:按照L9(34)正交錶安排各因素水平的細胞電敏感性實驗,以檯盼藍染色計數確定細胞存活率,最接近50%存活率為最優方案,根據最優方案將CHO-dhfr-細胞與DNA混勻電穿孔轉染以驗證正交設計結果.結果:CHO-dhfr-細胞電轉染的優化參數為低離子彊度Tris-Cl緩遲液、750 V/cm、50μF、電擊2次、間隔1 min,各因素對轉染的影響大小依次為緩遲液、電場彊度、脈遲次數、電容.結論:確定瞭電穿孔法轉染CHO-dhfr-細胞的方法,為進一步應用該細胞株錶達重組蛋白打下瞭基礎.
목적:탐토세포전천공전염적우화방법.방법:안조L9(34)정교표안배각인소수평적세포전민감성실험,이태반람염색계수학정세포존활솔,최접근50%존활솔위최우방안,근거최우방안장CHO-dhfr-세포여DNA혼균전천공전염이험증정교설계결과.결과:CHO-dhfr-세포전전염적우화삼수위저리자강도Tris-Cl완충액、750 V/cm、50μF、전격2차、간격1 min,각인소대전염적영향대소의차위완충액、전장강도、맥충차수、전용.결론:학정료전천공법전염CHO-dhfr-세포적방법,위진일보응용해세포주표체중조단백타하료기출.
