华南农业大学学报
華南農業大學學報
화남농업대학학보
JOURNAL OF SOUTH CHINA AGRICULTURAL UNIVERSITY
2011年
4期
101-104
,共4页
张婧%董嘉文%罗永文%郭霄峰
張婧%董嘉文%囉永文%郭霄峰
장청%동가문%라영문%곽소봉
Ⅰ型鸭肝炎病毒%鸭瘟病毒%VP1基因%载体构建
Ⅰ型鴨肝炎病毒%鴨瘟病毒%VP1基因%載體構建
Ⅰ형압간염병독%압온병독%VP1기인%재체구건
为了构建含有Ⅰ型鸭肝炎病毒VP1基因的重组鸭瘟病毒,将已建立的鸭瘟病毒TK基因缺失转移载体(pBlueSK-TK-EGFP)进行改造,在其绿色荧光表达盒内插入Ⅰ型鸭肝炎病毒VP1基因,将重组后的转移载体( pBlueSK-TK-EGFP-VP1)转染已感染鸭瘟病毒的鸭胚成纤维细胞.原始病毒液在鸭胚成纤维细胞上盲传3代后仍能观察到绿色荧光;以Ⅰ型鸭肝炎病毒阳性血清对pBlueSK-TK-EGFP-VP1转染的细胞样品作Westen-blot检测,出现特异条带,且相对分子质量约为54 000.结果表明该研究已成功构建携带Ⅰ型鸭肝炎病毒VP1基因的鸭瘟病毒TK基因缺失转移载体,其能够在真核细胞中正确表达.
為瞭構建含有Ⅰ型鴨肝炎病毒VP1基因的重組鴨瘟病毒,將已建立的鴨瘟病毒TK基因缺失轉移載體(pBlueSK-TK-EGFP)進行改造,在其綠色熒光錶達盒內插入Ⅰ型鴨肝炎病毒VP1基因,將重組後的轉移載體( pBlueSK-TK-EGFP-VP1)轉染已感染鴨瘟病毒的鴨胚成纖維細胞.原始病毒液在鴨胚成纖維細胞上盲傳3代後仍能觀察到綠色熒光;以Ⅰ型鴨肝炎病毒暘性血清對pBlueSK-TK-EGFP-VP1轉染的細胞樣品作Westen-blot檢測,齣現特異條帶,且相對分子質量約為54 000.結果錶明該研究已成功構建攜帶Ⅰ型鴨肝炎病毒VP1基因的鴨瘟病毒TK基因缺失轉移載體,其能夠在真覈細胞中正確錶達.
위료구건함유Ⅰ형압간염병독VP1기인적중조압온병독,장이건립적압온병독TK기인결실전이재체(pBlueSK-TK-EGFP)진행개조,재기록색형광표체합내삽입Ⅰ형압간염병독VP1기인,장중조후적전이재체( pBlueSK-TK-EGFP-VP1)전염이감염압온병독적압배성섬유세포.원시병독액재압배성섬유세포상맹전3대후잉능관찰도록색형광;이Ⅰ형압간염병독양성혈청대pBlueSK-TK-EGFP-VP1전염적세포양품작Westen-blot검측,출현특이조대,차상대분자질량약위54 000.결과표명해연구이성공구건휴대Ⅰ형압간염병독VP1기인적압온병독TK기인결실전이재체,기능구재진핵세포중정학표체.
