中华微生物学和免疫学杂志
中華微生物學和免疫學雜誌
중화미생물학화면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
2007年
7期
612-614
,共3页
陆学东%张银辉%崔素文%杨来智%曾青卿%刘键%张小艳
陸學東%張銀輝%崔素文%楊來智%曾青卿%劉鍵%張小豔
륙학동%장은휘%최소문%양래지%증청경%류건%장소염
HIV-1%gag基因%重组抗原
HIV-1%gag基因%重組抗原
HIV-1%gag기인%중조항원
目的 获得HIV-1型gag基因p17+24重组抗原,分析其免疫原性和探讨开发诊断试剂的可能性.方法 采用PCR技术扩增HIV-1 gag基因p17+p24核酸片段,并克隆入pTrcHis2A表达质粒,在大肠杆菌BL21(DK3)株中表达.用Ni-NTA金属螯合层析法纯化目的蛋白,并用免疫印迹法分析纯化蛋白的抗原特异性.结果 重组质粒在BL21(DE3)菌株中经IPTG诱导表达一个相对分子质量(Mr)约为51×103的融合重组蛋白,重组蛋白经HIV-1 p17、p24抗原单克隆抗体鉴定,具有抗原特异性.25份HIV阳性血清、180份HIV阴性血清标本初步经临床验证,具有较高的检出敏感性和特异性.结论 成功构建HIV-1型gag基因p17+24抗原表达载体,表达纯化的p17+24重组抗原具有较好的抗原性,可用于诊断试剂的开发.
目的 穫得HIV-1型gag基因p17+24重組抗原,分析其免疫原性和探討開髮診斷試劑的可能性.方法 採用PCR技術擴增HIV-1 gag基因p17+p24覈痠片段,併剋隆入pTrcHis2A錶達質粒,在大腸桿菌BL21(DK3)株中錶達.用Ni-NTA金屬螯閤層析法純化目的蛋白,併用免疫印跡法分析純化蛋白的抗原特異性.結果 重組質粒在BL21(DE3)菌株中經IPTG誘導錶達一箇相對分子質量(Mr)約為51×103的融閤重組蛋白,重組蛋白經HIV-1 p17、p24抗原單剋隆抗體鑒定,具有抗原特異性.25份HIV暘性血清、180份HIV陰性血清標本初步經臨床驗證,具有較高的檢齣敏感性和特異性.結論 成功構建HIV-1型gag基因p17+24抗原錶達載體,錶達純化的p17+24重組抗原具有較好的抗原性,可用于診斷試劑的開髮.
목적 획득HIV-1형gag기인p17+24중조항원,분석기면역원성화탐토개발진단시제적가능성.방법 채용PCR기술확증HIV-1 gag기인p17+p24핵산편단,병극륭입pTrcHis2A표체질립,재대장간균BL21(DK3)주중표체.용Ni-NTA금속오합층석법순화목적단백,병용면역인적법분석순화단백적항원특이성.결과 중조질립재BL21(DE3)균주중경IPTG유도표체일개상대분자질량(Mr)약위51×103적융합중조단백,중조단백경HIV-1 p17、p24항원단극륭항체감정,구유항원특이성.25빈HIV양성혈청、180빈HIV음성혈청표본초보경림상험증,구유교고적검출민감성화특이성.결론 성공구건HIV-1형gag기인p17+24항원표체재체,표체순화적p17+24중조항원구유교호적항원성,가용우진단시제적개발.
