实验生物学报
實驗生物學報
실험생물학보
ACTA BIOLOGIAE EXPERIMENTLIS SINICA
2001年
3期
219-225
,共7页
王丽影%陈伉俪%苏剑敏%靳嘉巍%陈惠黎%查锡良
王麗影%陳伉儷%囌劍敏%靳嘉巍%陳惠黎%查錫良
왕려영%진항려%소검민%근가외%진혜려%사석량
N-乙酰氨基葡萄糖转移酶V%整合蛋白%E-钙粘蛋白%β-连环蛋白
N-乙酰氨基葡萄糖轉移酶V%整閤蛋白%E-鈣粘蛋白%β-連環蛋白
N-을선안기포도당전이매V%정합단백%E-개점단백%β-련배단백
为了探讨转染N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅴ(GnT-V)正义cDNA后对7721细胞迁移影响及其机制,我们研究了GnT-V/7721和pcDNA3/7721(对照组)两株细胞的迁移力及其与侵袭转移能力密切相关的细胞表面重要粘附分子整合蛋白和E-钙粘蛋白的表达情况.通过琼脂滴法检测两株细胞的迁移力;间接免疫荧光法测定细胞表面整合蛋白α5和β1的含量及用RT-PCR方法检测细胞整合蛋白α5和β1的mRNA水平;免疫细胞化学ABC法检测了细胞E-钙粘蛋白表达水平;Western杂交方法检测β-连环蛋白含量.结果发现,7721细胞经转染GnT-V cDNA后,迁移力明显增高;整合蛋白α5亚基的含量比对照组增加2.9倍;β1亚基未见明显变化.α5亚基mRNA水平为对照细胞的2.1倍,β1亚基的mRNA含量无明显改变.GnT-V/7721细胞E-钙粘蛋白及β-连环蛋白表达也有不同程度的升高.本文结果提示与N-糖链加工有关的GnT-V过表达,可促进7721细胞表面整合蛋白的表达以及E-钙粘蛋白β-连环蛋白的表达,从而增加肿瘤细胞的迁移能力.
為瞭探討轉染N-乙酰氨基葡萄糖轉移酶Ⅴ(GnT-V)正義cDNA後對7721細胞遷移影響及其機製,我們研究瞭GnT-V/7721和pcDNA3/7721(對照組)兩株細胞的遷移力及其與侵襲轉移能力密切相關的細胞錶麵重要粘附分子整閤蛋白和E-鈣粘蛋白的錶達情況.通過瓊脂滴法檢測兩株細胞的遷移力;間接免疫熒光法測定細胞錶麵整閤蛋白α5和β1的含量及用RT-PCR方法檢測細胞整閤蛋白α5和β1的mRNA水平;免疫細胞化學ABC法檢測瞭細胞E-鈣粘蛋白錶達水平;Western雜交方法檢測β-連環蛋白含量.結果髮現,7721細胞經轉染GnT-V cDNA後,遷移力明顯增高;整閤蛋白α5亞基的含量比對照組增加2.9倍;β1亞基未見明顯變化.α5亞基mRNA水平為對照細胞的2.1倍,β1亞基的mRNA含量無明顯改變.GnT-V/7721細胞E-鈣粘蛋白及β-連環蛋白錶達也有不同程度的升高.本文結果提示與N-糖鏈加工有關的GnT-V過錶達,可促進7721細胞錶麵整閤蛋白的錶達以及E-鈣粘蛋白β-連環蛋白的錶達,從而增加腫瘤細胞的遷移能力.
위료탐토전염N-을선안기포도당전이매Ⅴ(GnT-V)정의cDNA후대7721세포천이영향급기궤제,아문연구료GnT-V/7721화pcDNA3/7721(대조조)량주세포적천이력급기여침습전이능력밀절상관적세포표면중요점부분자정합단백화E-개점단백적표체정황.통과경지적법검측량주세포적천이력;간접면역형광법측정세포표면정합단백α5화β1적함량급용RT-PCR방법검측세포정합단백α5화β1적mRNA수평;면역세포화학ABC법검측료세포E-개점단백표체수평;Western잡교방법검측β-련배단백함량.결과발현,7721세포경전염GnT-V cDNA후,천이력명현증고;정합단백α5아기적함량비대조조증가2.9배;β1아기미견명현변화.α5아기mRNA수평위대조세포적2.1배,β1아기적mRNA함량무명현개변.GnT-V/7721세포E-개점단백급β-련배단백표체야유불동정도적승고.본문결과제시여N-당련가공유관적GnT-V과표체,가촉진7721세포표면정합단백적표체이급E-개점단백β-련배단백적표체,종이증가종류세포적천이능력.
