西安交通大学学报（医学版）
西安交通大學學報（醫學版）
서안교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF XI'AN JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2005年
2期
115-118,123
,共5页
刘苏虎%张王刚%张镁%朱青%田玮%孙静昕
劉囌虎%張王剛%張鎂%硃青%田瑋%孫靜昕
류소호%장왕강%장미%주청%전위%손정흔
Fas蛋白%RNA干扰%质粒%载体构建
Fas蛋白%RNA榦擾%質粒%載體構建
Fas단백%RNA간우%질립%재체구건
目的构建Fas靶向的RNA干扰质粒载体,为探讨抑制Fas表达在急性再生障碍性贫血治疗中的意义奠定基础.方法 PCR法获得U6启动子序列以及产生siRNA的相应DNA模板序列,将其克隆入改造后的pcDNA3.1,获得RNA干扰载体pU6-siFas.脂质体法将pU6-siFas导入P815细胞,免疫组化法检测对P815细胞Fas表达的抑制情况.结果所构建的载体pU6-siFas能够干扰P815细胞中Fas的表达,并且具有新霉素抗性,能够用G-418筛选稳定转化的细胞株.结论成功构建了抑制小鼠Fas表达的RNA干扰质粒载体.
目的構建Fas靶嚮的RNA榦擾質粒載體,為探討抑製Fas錶達在急性再生障礙性貧血治療中的意義奠定基礎.方法 PCR法穫得U6啟動子序列以及產生siRNA的相應DNA模闆序列,將其剋隆入改造後的pcDNA3.1,穫得RNA榦擾載體pU6-siFas.脂質體法將pU6-siFas導入P815細胞,免疫組化法檢測對P815細胞Fas錶達的抑製情況.結果所構建的載體pU6-siFas能夠榦擾P815細胞中Fas的錶達,併且具有新黴素抗性,能夠用G-418篩選穩定轉化的細胞株.結論成功構建瞭抑製小鼠Fas錶達的RNA榦擾質粒載體.
목적구건Fas파향적RNA간우질립재체,위탐토억제Fas표체재급성재생장애성빈혈치료중적의의전정기출.방법 PCR법획득U6계동자서렬이급산생siRNA적상응DNA모판서렬,장기극륭입개조후적pcDNA3.1,획득RNA간우재체pU6-siFas.지질체법장pU6-siFas도입P815세포,면역조화법검측대P815세포Fas표체적억제정황.결과소구건적재체pU6-siFas능구간우P815세포중Fas적표체,병차구유신매소항성,능구용G-418사선은정전화적세포주.결론성공구건료억제소서Fas표체적RNA간우질립재체.
