高技术通讯
高技術通訊
고기술통신
HIGH TECHNOLOGY LETTERS
2006年
3期
301-306
,共6页
张继泉%李富花%王在照%吴长功%相建海
張繼泉%李富花%王在照%吳長功%相建海
장계천%리부화%왕재조%오장공%상건해
中国明对虾%蜕皮抑制激素%原核表达%融合蛋白
中國明對蝦%蛻皮抑製激素%原覈錶達%融閤蛋白
중국명대하%세피억제격소%원핵표체%융합단백
采用大肠杆菌表达系统对中国明对虾蜕皮抑制激素(MIH)进行了体外重组表达研究.重组蛋白以包涵体的形式存在于菌体中.尿素-SDS-PAGE分析表明,经1mmol/L的IPTG诱导4h后,重组蛋白获得了大量表达,在分子量为13 kD处有一条与预测大小一致的特异性蛋白条带;经金属螯合柱纯化后,得到了电泳纯的融合蛋白.Western blotting检测结果表明:重组表达的融合蛋白与兔抗刀额新对虾MIH的多克隆抗体特异结合,证实该融合蛋白为中国明对虾MIH.通过胶内酶切与LC-ESI-MS分析进一步证实融合蛋白的部分肽段与日本对虾MIH一致.MIH融合蛋白的成功表达为进一步深入研究其在中国明对虾蜕皮过程分子作用机制奠定了基础.
採用大腸桿菌錶達繫統對中國明對蝦蛻皮抑製激素(MIH)進行瞭體外重組錶達研究.重組蛋白以包涵體的形式存在于菌體中.尿素-SDS-PAGE分析錶明,經1mmol/L的IPTG誘導4h後,重組蛋白穫得瞭大量錶達,在分子量為13 kD處有一條與預測大小一緻的特異性蛋白條帶;經金屬螯閤柱純化後,得到瞭電泳純的融閤蛋白.Western blotting檢測結果錶明:重組錶達的融閤蛋白與兔抗刀額新對蝦MIH的多剋隆抗體特異結閤,證實該融閤蛋白為中國明對蝦MIH.通過膠內酶切與LC-ESI-MS分析進一步證實融閤蛋白的部分肽段與日本對蝦MIH一緻.MIH融閤蛋白的成功錶達為進一步深入研究其在中國明對蝦蛻皮過程分子作用機製奠定瞭基礎.
채용대장간균표체계통대중국명대하세피억제격소(MIH)진행료체외중조표체연구.중조단백이포함체적형식존재우균체중.뇨소-SDS-PAGE분석표명,경1mmol/L적IPTG유도4h후,중조단백획득료대량표체,재분자량위13 kD처유일조여예측대소일치적특이성단백조대;경금속오합주순화후,득도료전영순적융합단백.Western blotting검측결과표명:중조표체적융합단백여토항도액신대하MIH적다극륭항체특이결합,증실해융합단백위중국명대하MIH.통과효내매절여LC-ESI-MS분석진일보증실융합단백적부분태단여일본대하MIH일치.MIH융합단백적성공표체위진일보심입연구기재중국명대하세피과정분자작용궤제전정료기출.
