中国老年学杂志
中國老年學雜誌
중국노년학잡지
CHINESE JOURNAL OF GERONTOLOGY
2008年
2期
128-130
,共3页
杨巍%YUAN Hong-Yan%郑旸%常雅萍
楊巍%YUAN Hong-Yan%鄭旸%常雅萍
양외%YUAN Hong-Yan%정양%상아평
WWOX%基因转染%抑瘤效应
WWOX%基因轉染%抑瘤效應
WWOX%기인전염%억류효응
目的 建立肿瘤抑制基因WWOX真核表达载体,观察其瞬时转染对肿瘤细胞凋亡的影响.方法 采用RT-PCR方法,从正常人胚肾细胞HEK-293中钓取WWOX基因,将其克隆至pMD18-T载体上,测序正确后克隆到真核表达载体peDNA4/myc-His中;采用脂质体介导法体外瞬时转染人肺腺癌A549细胞;RT-PCR法和Western印迹法分别检测WWOX基因mRNA和蛋白表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡率;克隆形成试验观察肿瘤细胞克隆形成能力的变化.结果 成功构建了WWOX的真核表达载体.体外转染的A549细胞凋亡率明显高于未转染和空载体转染细胞,且细胞克隆形成能力下降.形成率为35.43%,明显低于未转染细胞和空载体转染细胞.结论 所构建的poDNA4/myc-WWOX真核表达载体转染肿瘤细胞能够抑制肿瘤生长并诱导细胞凋亡.
目的 建立腫瘤抑製基因WWOX真覈錶達載體,觀察其瞬時轉染對腫瘤細胞凋亡的影響.方法 採用RT-PCR方法,從正常人胚腎細胞HEK-293中釣取WWOX基因,將其剋隆至pMD18-T載體上,測序正確後剋隆到真覈錶達載體peDNA4/myc-His中;採用脂質體介導法體外瞬時轉染人肺腺癌A549細胞;RT-PCR法和Western印跡法分彆檢測WWOX基因mRNA和蛋白錶達水平;流式細胞術檢測細胞凋亡率;剋隆形成試驗觀察腫瘤細胞剋隆形成能力的變化.結果 成功構建瞭WWOX的真覈錶達載體.體外轉染的A549細胞凋亡率明顯高于未轉染和空載體轉染細胞,且細胞剋隆形成能力下降.形成率為35.43%,明顯低于未轉染細胞和空載體轉染細胞.結論 所構建的poDNA4/myc-WWOX真覈錶達載體轉染腫瘤細胞能夠抑製腫瘤生長併誘導細胞凋亡.
목적 건립종류억제기인WWOX진핵표체재체,관찰기순시전염대종류세포조망적영향.방법 채용RT-PCR방법,종정상인배신세포HEK-293중조취WWOX기인,장기극륭지pMD18-T재체상,측서정학후극륭도진핵표체재체peDNA4/myc-His중;채용지질체개도법체외순시전염인폐선암A549세포;RT-PCR법화Western인적법분별검측WWOX기인mRNA화단백표체수평;류식세포술검측세포조망솔;극륭형성시험관찰종류세포극륭형성능력적변화.결과 성공구건료WWOX적진핵표체재체.체외전염적A549세포조망솔명현고우미전염화공재체전염세포,차세포극륭형성능력하강.형성솔위35.43%,명현저우미전염세포화공재체전염세포.결론 소구건적poDNA4/myc-WWOX진핵표체재체전염종류세포능구억제종류생장병유도세포조망.
