中国药物与临床
中國藥物與臨床
중국약물여림상
CHINESE REMEDIES & CLINICS
2009年
2期
91-95,插页1
,共6页
刘京龙%邓志华%扬长青%刘燕%贾静%郭淑雅
劉京龍%鄧誌華%颺長青%劉燕%賈靜%郭淑雅
류경룡%산지화%양장청%류연%가정%곽숙아
基因打靶%肝肿瘤%h-TERT启动子%自杀基因
基因打靶%肝腫瘤%h-TERT啟動子%自殺基因
기인타파%간종류%h-TERT계동자%자살기인
目的 观察人端粒酶反转录酶-胸苷激酶/丙氧鸟苷(hTERT-TK/GCV)联合hTERT-胞嘧啶脱氨酶/5-氟胞嘧啶(CD/5-FC)对肝癌细胞株HepG2生长及凋亡的靶向杀伤效应.方法 细胞培养,构建pGL3-hTERT-CD质粒,hTERT-TK/GCV联合hTERT-CD/5-FC同时转染HepG2细胞和正常肝细胞L-02,用噻唑蓝(MTT)法观察药物浓度对肝癌细胞存活率的影响,用DNA缺口末端标记法(TUNEL)观察自杀基因对肝癌细胞生长和凋亡的影响,以及对旁观者效应的观察.结果 MTT法显示hTERT启动子驱动下两自杀基因体系可以协同表达于肝癌细胞,当GCV为20 μg/ml,5-FC为200 μg/ml时,对HepG2细胞的杀伤作用达到最大.TUNEL法显示在肝癌细胞中,自杀基因一被启动子高效表达,产生凋亡小体和明显的细胞凋亡率,转染正常肝细胞无此现象.结论 hTERT-TK/GCV联合hTERT-CD/5-FC基因体系能够靶向杀伤肝癌细胞,存在明显的旁观者效应,弥补了基因治疗转染效率不高的问题,便于指导今后的实验和研究.
目的 觀察人耑粒酶反轉錄酶-胸苷激酶/丙氧鳥苷(hTERT-TK/GCV)聯閤hTERT-胞嘧啶脫氨酶/5-氟胞嘧啶(CD/5-FC)對肝癌細胞株HepG2生長及凋亡的靶嚮殺傷效應.方法 細胞培養,構建pGL3-hTERT-CD質粒,hTERT-TK/GCV聯閤hTERT-CD/5-FC同時轉染HepG2細胞和正常肝細胞L-02,用噻唑藍(MTT)法觀察藥物濃度對肝癌細胞存活率的影響,用DNA缺口末耑標記法(TUNEL)觀察自殺基因對肝癌細胞生長和凋亡的影響,以及對徬觀者效應的觀察.結果 MTT法顯示hTERT啟動子驅動下兩自殺基因體繫可以協同錶達于肝癌細胞,噹GCV為20 μg/ml,5-FC為200 μg/ml時,對HepG2細胞的殺傷作用達到最大.TUNEL法顯示在肝癌細胞中,自殺基因一被啟動子高效錶達,產生凋亡小體和明顯的細胞凋亡率,轉染正常肝細胞無此現象.結論 hTERT-TK/GCV聯閤hTERT-CD/5-FC基因體繫能夠靶嚮殺傷肝癌細胞,存在明顯的徬觀者效應,瀰補瞭基因治療轉染效率不高的問題,便于指導今後的實驗和研究.
목적 관찰인단립매반전록매-흉감격매/병양조감(hTERT-TK/GCV)연합hTERT-포밀정탈안매/5-불포밀정(CD/5-FC)대간암세포주HepG2생장급조망적파향살상효응.방법 세포배양,구건pGL3-hTERT-CD질립,hTERT-TK/GCV연합hTERT-CD/5-FC동시전염HepG2세포화정상간세포L-02,용새서람(MTT)법관찰약물농도대간암세포존활솔적영향,용DNA결구말단표기법(TUNEL)관찰자살기인대간암세포생장화조망적영향,이급대방관자효응적관찰.결과 MTT법현시hTERT계동자구동하량자살기인체계가이협동표체우간암세포,당GCV위20 μg/ml,5-FC위200 μg/ml시,대HepG2세포적살상작용체도최대.TUNEL법현시재간암세포중,자살기인일피계동자고효표체,산생조망소체화명현적세포조망솔,전염정상간세포무차현상.결론 hTERT-TK/GCV연합hTERT-CD/5-FC기인체계능구파향살상간암세포,존재명현적방관자효응,미보료기인치료전염효솔불고적문제,편우지도금후적실험화연구.
