CAJ | 학술논문

果蝇l(3)neo18基因可以通过P转座子诱发致死突变,编码的蛋白质具有还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶(ND)的功能.利用生物信息学、cDNA末端快速扩增(RACE)和反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)等方法,克隆了家蚕l(3)neo18同源基因,分析了基因结构与表达谱.Bm-l(3)neo18基因(EU826676)的cDNA全长为868 bp,由573 bp的完整开放读码框(ORF)序列、25 bp的5′端非翻译区序列(5′-UTR)和251 bp的3′端非编码区序列(3′-UTR)组成,编码蛋白质为190个氨基酸残基,分子质量22.7 kD,pI 9.60.Bm-l(3)neo18基因由3个外显子和2个内含子组成,定位于家蚕第3染色体,位于nscaf2930的1 203.8-1 205.6 knt.Bm-l(3)neo18蛋白质在1-185氨基酸残基位置为ND的SGDH亚基保守区,在61-83氨基酸残基位置具有一个保守的跨膜区域.采用Clustal W进行多序列比对发现,Bm-l(3)neo18与埃及伊蚊等昆虫ND具有50%以上的蛋白质同源性,ND的保守区域高度一致,NJ法分子进化分析也显示Bm-l(3)neo18与昆虫ND进化上同源.该基因除在家蚕卵期的表达量较低外,在幼虫、蛹和蛾期均有较高表达,且存在组织差异性.
과승l(3)neo18기인가이통과P전좌자유발치사돌변,편마적단백질구유환원형연선알선표령이핵감산(NADH)탈경매(ND)적공능.이용생물신식학、cDNA말단쾌속확증(RACE)화반전록취합매련식반응(RT-PCR)등방법,극륭료가잠l(3)neo18동원기인,분석료기인결구여표체보.Bm-l(3)neo18기인(EU826676)적cDNA전장위868 bp,유573 bp적완정개방독마광(ORF)서렬、25 bp적5′단비번역구서렬(5′-UTR)화251 bp적3′단비편마구서렬(3′-UTR)조성,편마단백질위190개안기산잔기,분자질량22.7 kD,pI 9.60.Bm-l(3)neo18기인유3개외현자화2개내함자조성,정위우가잠제3염색체,위우nscaf2930적1 203.8-1 205.6 knt.Bm-l(3)neo18단백질재1-185안기산잔기위치위ND적SGDH아기보수구,재61-83안기산잔기위치구유일개보수적과막구역.채용Clustal W진행다서렬비대발현,Bm-l(3)neo18여애급이문등곤충ND구유50%이상적단백질동원성,ND적보수구역고도일치,NJ법분자진화분석야현시Bm-l(3)neo18여곤충ND진화상동원.해기인제재가잠란기적표체량교저외,재유충、용화아기균유교고표체,차존재조직차이성.