CAJ | 학술논문

目的研究广州东部人乳头瘤病毒基因型分布特征,并获取优势基因型早基因E6/E7的核酸序列,进行变异分析,为本课题组下一步新型分子诊断方法的研发提供目标序列.方法通过导流杂交基因芯片技术进行宫颈脱落细胞标本的人乳头瘤病毒基因分型检测,分析本地区基因型分布特征,确定优势基因型;根据GenBank序列设计特异性引物,用于扩增优势基因型的早基因E6/E7的编码区序列,克隆后测序并对序列进行变异分析.结果通过导流杂交基因芯片技术进行宫颈脱落细胞标本的分型检测,检测了536份宫颈脱落细胞标本, HPV阳性占27.2%(146/536),其中多基因型感染占29.5%(43/146),高危型感染中52型为优势基因型,频数达23.3%(37/159).HPV感染与52型HPV感染的年龄分布显示低年龄组(即A组,≤25岁)妇女最高.3份52型HPV感染阳性标本的核酸模板,通过特异性引物均成功扩增出大小接近750bp的目的序列;分别克隆到T载体上并测序,得到3条人乳头瘤病毒52型早表达基因E6/E7的编码区序列,克隆后测序并对序列进行变异分析;3条序列经BLAST分析,与GenBank数据库HPV52型序列 (Accession: X74481)的E6/E7编码区序列一致性均为99%,三条序列(EU924143、EU924144、EU924145)存在6种碱基置换,其中2种可引起所编码的相应氨基酸残基改变.结论本研究可确认广州东部地区妇女宫颈感染HPV中A组(17-25岁)具有最高的感染率;宫颈感染HPV的优势基因型为52型;我们通过克隆策略得到了与HPV高危型52型X74481高度相似的E6/E7编码序列,为课题组后续进行的HPV致病机制和新型分子检测方法研究提供了重要基础.
목적 연구엄주동부인유두류병독기인형분포특정,병획취우세기인형조기인E6/E7적핵산서렬,진행변이분석,위본과제조하일보신형분자진단방법적연발제공목표서렬.방법 통과도류잡교기인심편기술진행궁경탈락세포표본적인유두류병독기인분형검측,분석본지구기인형분포특정,학정우세기인형;근거GenBank서렬설계특이성인물,용우확증우세기인형적조기인E6/E7적편마구서렬,극륭후측서병대서렬진행변이분석.결과 통과도류잡교기인심편기술진행궁경탈락세포표본적분형검측,검측료536빈궁경탈락세포표본, HPV양성점27.2%(146/536),기중다기인형감염점29.5%(43/146),고위형감염중52형위우세기인형,빈수체23.3%(37/159).HPV감염여52형HPV감염적년령분포현시저년령조(즉A조,≤25세)부녀최고.3빈52형HPV감염양성표본적핵산모판,통과특이성인물균성공확증출대소접근750bp적목적 서렬;분별극륭도T재체상병측서,득도3조인유두류병독52형조표체기인E6/E7적편마구서렬,극륭후측서병대서렬진행변이분석;3조서렬경BLAST분석,여GenBank수거고HPV52형서렬 (Accession: X74481)적E6/E7편마구서렬일치성균위99%,삼조서렬(EU924143、EU924144、EU924145)존재6충감기치환,기중2충가인기소편마적상응안기산잔기개변.결론 본연구가학인엄주동부지구부녀궁경감염HPV중A조(17-25세)구유최고적감염솔;궁경감염HPV적우세기인형위52형;아문통과극륭책략득도료여HPV고위형52형X74481고도상사적E6/E7편마서렬,위과제조후속진행적HPV치병궤제화신형분자검측방법연구제공료중요기출.