农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2010年
4期
670-675
,共6页
范荣伟%谢华%姚磊%马荣才
範榮偉%謝華%姚磊%馬榮纔
범영위%사화%요뢰%마영재
大白菜%BrWRKY33%上游调控序列%转录因子%软腐病
大白菜%BrWRKY33%上遊調控序列%轉錄因子%軟腐病
대백채%BrWRKY33%상유조공서렬%전록인자%연부병
根据大白菜EST和基因组序列,利用PCR技术从大白菜品种龙白二号(Brassica rapa subp.pekinensis cv.LongbaiⅡ)基因组中克隆转录因子基因BrWRKY33起始密码子上游大小1 755 bp的调控序列.然后,构建5'端缺失突变体,与gus基因融合,构建植物表达载体.将载体转化拟南芥(Arabidopsis thaliana)哥伦比亚生态型(Columbia ecotype),进行植物组织GUS化学染色分析.结果表明,BrWRKY33密码子上游-1 755～-315区域存在的多个W-box元件可能与该基因表达的负调控相关,-315 bp区域含有BrWRKY33基因转录必需的基本元件.对接种软腐欧文氏菌(Erwinia carotovora subsp.carotovora)后不同时期的植株进行染色,发现该病原菌侵染使转基因植株gus基因表达量增加,表明BrWRKY33基因在植物对软腐病抗性反应中具有一定的作用.
根據大白菜EST和基因組序列,利用PCR技術從大白菜品種龍白二號(Brassica rapa subp.pekinensis cv.LongbaiⅡ)基因組中剋隆轉錄因子基因BrWRKY33起始密碼子上遊大小1 755 bp的調控序列.然後,構建5'耑缺失突變體,與gus基因融閤,構建植物錶達載體.將載體轉化擬南芥(Arabidopsis thaliana)哥倫比亞生態型(Columbia ecotype),進行植物組織GUS化學染色分析.結果錶明,BrWRKY33密碼子上遊-1 755～-315區域存在的多箇W-box元件可能與該基因錶達的負調控相關,-315 bp區域含有BrWRKY33基因轉錄必需的基本元件.對接種軟腐歐文氏菌(Erwinia carotovora subsp.carotovora)後不同時期的植株進行染色,髮現該病原菌侵染使轉基因植株gus基因錶達量增加,錶明BrWRKY33基因在植物對軟腐病抗性反應中具有一定的作用.
근거대백채EST화기인조서렬,이용PCR기술종대백채품충룡백이호(Brassica rapa subp.pekinensis cv.LongbaiⅡ)기인조중극륭전록인자기인BrWRKY33기시밀마자상유대소1 755 bp적조공서렬.연후,구건5'단결실돌변체,여gus기인융합,구건식물표체재체.장재체전화의남개(Arabidopsis thaliana)가륜비아생태형(Columbia ecotype),진행식물조직GUS화학염색분석.결과표명,BrWRKY33밀마자상유-1 755～-315구역존재적다개W-box원건가능여해기인표체적부조공상관,-315 bp구역함유BrWRKY33기인전록필수적기본원건.대접충연부구문씨균(Erwinia carotovora subsp.carotovora)후불동시기적식주진행염색,발현해병원균침염사전기인식주gus기인표체량증가,표명BrWRKY33기인재식물대연부병항성반응중구유일정적작용.
