CAJ | 학술논문

通过从已构建好的突变体湘棉-18的cDNA文库中筛选分离出一个半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因的全长cDNA序列,经测序和序列分析,发现该片段包含一个完整的开放阅读框,长378个碱基,编码125个氨基酸,氨基酸序列中包含了一个半胱氨酸蛋白酶抑制剂家族的保守区段Gln-Val-Val-Ala-Gly;信号肽预测发现该序列包含一个N端信号肽,保守区分析该基因编码的氨基酸包含一个半胱氨酸蛋白酶抑制剂相似区域.半胱氨酸蛋白酶抑制剂在大肠杆菌中表达重组蛋白,在条件为30℃,IPTG 5 mmol/L,时间24～36 h时,CPI实现最优表达,Western Blotting分析表明表达的蛋白正确.通过木瓜蛋白酶活性抑制实验,结果表明该重组CPI具有一定的酶活抑制作用.
통과종이구건호적돌변체상면-18적cDNA문고중사선분리출일개반광안산단백매억제제기인적전장cDNA서렬,경측서화서렬분석,발현해편단포함일개완정적개방열독광,장378개감기,편마125개안기산,안기산서렬중포함료일개반광안산단백매억제제가족적보수구단Gln-Val-Val-Ala-Gly;신호태예측발현해서렬포함일개N단신호태,보수구분석해기인편마적안기산포함일개반광안산단백매억제제상사구역.반광안산단백매억제제재대장간균중표체중조단백,재조건위30℃,IPTG 5 mmol/L,시간24～36 h시,CPI실현최우표체,Western Blotting분석표명표체적단백정학.통과목과단백매활성억제실험,결과표명해중조CPI구유일정적매활억제작용.