中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2011年
11期
1054-1056
,共3页
林飞飞%冯康乐%雷银蕉%戎春浩%盛思%阮萍
林飛飛%馮康樂%雷銀蕉%戎春浩%盛思%阮萍
림비비%풍강악%뢰은초%융춘호%성사%원평
甲型副伤寒杆菌%ompW基因%表达%鉴定
甲型副傷寒桿菌%ompW基因%錶達%鑒定
갑형부상한간균%ompW기인%표체%감정
目的 构建甲型副伤寒杆菌外膜蛋白基因ompW的原核表达系统,确定其重组表达产物rOmpW免疫原性,了解甲型副伤寒杆菌临床菌株ompW基因携带率.方法 采用PCR和T-A克隆法从甲型副伤寒杆菌临床株JH01中获得ompW基因克隆并构建其原核表达系统,重组蛋白纯化后用SDS-PAGE及Western-Blotting分析.采用PCR检测95株甲型副伤寒杆菌临床菌株ompW基因携带率.结果 与报道的相关序列比较,所克隆的ompW基因核苷酸和氨基酸序列相似性均为100%.rOmpW免疫家兔可产生抗体并能与甲型副伤寒杆菌全菌抗血清产生阳性Western杂交信号.所有甲型副伤寒杆菌菌株均携带ompW基因.结论 构建甲型副伤寒杆菌外膜蛋白基因ompW的原核表达系统,证明了ompW是存在于甲型副伤寒杆菌的序列保守、分布广泛的外膜蛋白基因,为进一步研究该蛋白作为多价甲型副伤寒杆菌基因工程疫苗候选抗原奠定基础.
目的 構建甲型副傷寒桿菌外膜蛋白基因ompW的原覈錶達繫統,確定其重組錶達產物rOmpW免疫原性,瞭解甲型副傷寒桿菌臨床菌株ompW基因攜帶率.方法 採用PCR和T-A剋隆法從甲型副傷寒桿菌臨床株JH01中穫得ompW基因剋隆併構建其原覈錶達繫統,重組蛋白純化後用SDS-PAGE及Western-Blotting分析.採用PCR檢測95株甲型副傷寒桿菌臨床菌株ompW基因攜帶率.結果 與報道的相關序列比較,所剋隆的ompW基因覈苷痠和氨基痠序列相似性均為100%.rOmpW免疫傢兔可產生抗體併能與甲型副傷寒桿菌全菌抗血清產生暘性Western雜交信號.所有甲型副傷寒桿菌菌株均攜帶ompW基因.結論 構建甲型副傷寒桿菌外膜蛋白基因ompW的原覈錶達繫統,證明瞭ompW是存在于甲型副傷寒桿菌的序列保守、分佈廣汎的外膜蛋白基因,為進一步研究該蛋白作為多價甲型副傷寒桿菌基因工程疫苗候選抗原奠定基礎.
목적 구건갑형부상한간균외막단백기인ompW적원핵표체계통,학정기중조표체산물rOmpW면역원성,료해갑형부상한간균림상균주ompW기인휴대솔.방법 채용PCR화T-A극륭법종갑형부상한간균림상주JH01중획득ompW기인극륭병구건기원핵표체계통,중조단백순화후용SDS-PAGE급Western-Blotting분석.채용PCR검측95주갑형부상한간균림상균주ompW기인휴대솔.결과 여보도적상관서렬비교,소극륭적ompW기인핵감산화안기산서렬상사성균위100%.rOmpW면역가토가산생항체병능여갑형부상한간균전균항혈청산생양성Western잡교신호.소유갑형부상한간균균주균휴대ompW기인.결론 구건갑형부상한간균외막단백기인ompW적원핵표체계통,증명료ompW시존재우갑형부상한간균적서렬보수、분포엄범적외막단백기인,위진일보연구해단백작위다개갑형부상한간균기인공정역묘후선항원전정기출.