中国组织工程研究
中國組織工程研究
중국조직공정연구
Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research
2012年
10期
1879-1883
,共5页
马明瑛%靳志平%王伟%郭智%吴彬%谭晓华
馬明瑛%靳誌平%王偉%郭智%吳彬%譚曉華
마명영%근지평%왕위%곽지%오빈%담효화
明胶%单核细胞%树突状细胞%人外周血%单个核细胞
明膠%單覈細胞%樹突狀細胞%人外週血%單箇覈細胞
명효%단핵세포%수돌상세포%인외주혈%단개핵세포
背景:如何简易高效分离纯化人外周血单核细胞并刺激成熟为树突状细胞,未见标准化操作流程.目的:观察明胶法分离外周血单核细胞的效率以及将分离出的单核细胞刺激成熟为树突状细胞的表型特征,并与普通塑料黏附法对比.方法:使用人淋巴细胞分离液分离人外周血得到单个核细胞,根据培养瓶是否进行明胶包被分为明胶包被组和普通塑料组.均分单个核细胞,按组别分离获得单核细胞并诱导刺激成熟为树突状细胞.计数各组所得单核细胞数,使用流式细胞仪检测2 组单核细胞的CD14 阳性率、T、B 淋巴细胞污染率、树突状细胞非成熟期和成熟期CD1a,CD83 的表达情况,锥虫蓝拒染法计算细胞活率,观察对比2 组血小板污染情况.结果与结论:明胶包被组单核细胞数及CD14 阳性率显著高于普通塑料组(P < 0.05),普通塑料组淋巴细胞污染率显著高于明胶包被组(P < 0.05).2 组细胞活率及树突状细胞表型差异无显著性意义(P >0.05).明胶包被组血小板污染率低于普通塑料组.提示明胶法可以简单高效分离出单核细胞并成功刺激成熟为树突状细胞.
揹景:如何簡易高效分離純化人外週血單覈細胞併刺激成熟為樹突狀細胞,未見標準化操作流程.目的:觀察明膠法分離外週血單覈細胞的效率以及將分離齣的單覈細胞刺激成熟為樹突狀細胞的錶型特徵,併與普通塑料黏附法對比.方法:使用人淋巴細胞分離液分離人外週血得到單箇覈細胞,根據培養瓶是否進行明膠包被分為明膠包被組和普通塑料組.均分單箇覈細胞,按組彆分離穫得單覈細胞併誘導刺激成熟為樹突狀細胞.計數各組所得單覈細胞數,使用流式細胞儀檢測2 組單覈細胞的CD14 暘性率、T、B 淋巴細胞汙染率、樹突狀細胞非成熟期和成熟期CD1a,CD83 的錶達情況,錐蟲藍拒染法計算細胞活率,觀察對比2 組血小闆汙染情況.結果與結論:明膠包被組單覈細胞數及CD14 暘性率顯著高于普通塑料組(P < 0.05),普通塑料組淋巴細胞汙染率顯著高于明膠包被組(P < 0.05).2 組細胞活率及樹突狀細胞錶型差異無顯著性意義(P >0.05).明膠包被組血小闆汙染率低于普通塑料組.提示明膠法可以簡單高效分離齣單覈細胞併成功刺激成熟為樹突狀細胞.
배경:여하간역고효분리순화인외주혈단핵세포병자격성숙위수돌상세포,미견표준화조작류정.목적:관찰명효법분리외주혈단핵세포적효솔이급장분리출적단핵세포자격성숙위수돌상세포적표형특정,병여보통소료점부법대비.방법:사용인림파세포분리액분리인외주혈득도단개핵세포,근거배양병시부진행명효포피분위명효포피조화보통소료조.균분단개핵세포,안조별분리획득단핵세포병유도자격성숙위수돌상세포.계수각조소득단핵세포수,사용류식세포의검측2 조단핵세포적CD14 양성솔、T、B 림파세포오염솔、수돌상세포비성숙기화성숙기CD1a,CD83 적표체정황,추충람거염법계산세포활솔,관찰대비2 조혈소판오염정황.결과여결론:명효포피조단핵세포수급CD14 양성솔현저고우보통소료조(P < 0.05),보통소료조림파세포오염솔현저고우명효포피조(P < 0.05).2 조세포활솔급수돌상세포표형차이무현저성의의(P >0.05).명효포피조혈소판오염솔저우보통소료조.제시명효법가이간단고효분리출단핵세포병성공자격성숙위수돌상세포.
