生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2012年
8期
194-198
,共5页
孟飞%俞春娜%李海峰%谢恬
孟飛%俞春娜%李海峰%謝恬
맹비%유춘나%리해봉%사념
圆柚酮%瓦伦西亚烯%细胞色素P450BM-3%突变体%生物催化
圓柚酮%瓦倫西亞烯%細胞色素P450BM-3%突變體%生物催化
원유동%와륜서아희%세포색소P450BM-3%돌변체%생물최화
在体外,利用野生型CYP450BM-3对瓦伦西亚烯进行催化,酶-底物复合物催化NADPH氧化的速率为31±1.0 nmol( nmol P450) -1min-1,但催化产物中没有检测到圆柚酮的生成.突变体R47L/Y51F/F87A与底物复合物催化NADPH氧化的速率高于野生型,为79±6.5 nmol( nmol P450) -1min-1,并在催化产物中检测到圆柚酮的生成,但其产物选择性较差,圆柚酮的含量仅占总产物的6.8％.与此同时,检测了另一个突变体A74G/F87V/L188Q对瓦伦西亚烯的催化效果,发现其与底物复合物对NADPH的氧化速率与突变体R47L/Y51F/F87A相当,但产物中圆柚酮的比率更高,达8.0％.
在體外,利用野生型CYP450BM-3對瓦倫西亞烯進行催化,酶-底物複閤物催化NADPH氧化的速率為31±1.0 nmol( nmol P450) -1min-1,但催化產物中沒有檢測到圓柚酮的生成.突變體R47L/Y51F/F87A與底物複閤物催化NADPH氧化的速率高于野生型,為79±6.5 nmol( nmol P450) -1min-1,併在催化產物中檢測到圓柚酮的生成,但其產物選擇性較差,圓柚酮的含量僅佔總產物的6.8％.與此同時,檢測瞭另一箇突變體A74G/F87V/L188Q對瓦倫西亞烯的催化效果,髮現其與底物複閤物對NADPH的氧化速率與突變體R47L/Y51F/F87A相噹,但產物中圓柚酮的比率更高,達8.0％.
재체외,이용야생형CYP450BM-3대와륜서아희진행최화,매-저물복합물최화NADPH양화적속솔위31±1.0 nmol( nmol P450) -1min-1,단최화산물중몰유검측도원유동적생성.돌변체R47L/Y51F/F87A여저물복합물최화NADPH양화적속솔고우야생형,위79±6.5 nmol( nmol P450) -1min-1,병재최화산물중검측도원유동적생성,단기산물선택성교차,원유동적함량부점총산물적6.8％.여차동시,검측료령일개돌변체A74G/F87V/L188Q대와륜서아희적최화효과,발현기여저물복합물대NADPH적양화속솔여돌변체R47L/Y51F/F87A상당,단산물중원유동적비솔경고,체8.0％.
