CAJ | 학술논문

目的建立重组人白细胞介素12(rhIL-12)的生物活性检测方法 ,观察rhIL-12诱导健康人外周血单个核细胞(PBMC)产生γ干扰素(IFN-γ)的水平与剂量和时间之间的关系,揭示其变化规律.方法 rhIL-12供试品刺激健康人PBMC分泌IFN-γ,经国际标准品校正,建立rhIL-12生物活性测定方法 .以1 ng/mL浓度rhIL-12诱导健康人PBMC,分别于24、48、72、96和120 h 5个时间点用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定培养上清的IFN-γ水平.测定0.1、0.5和2.5 ng/mL 3个浓度rhIL-12诱导人PBMC 72 h后培养上清的IFN-γ水平, 用Prism 5.0统计软件的重复测量方差分析法对所得数据进行统计学处理.结果 rhIL-12供试品的生物活性曲线呈典型S型,IFN-γ含量为最大浓度一半时的供试品浓度(ED50)为(1.008±0.238) ng/mL,供试品rhIL-12效价为7 938 IU/mL.测定1 ng/mL浓度rhIL-12刺激健康人PBMC后5个时间点培养上清中IFN-γ显示,不同个体高峰出现时间有所不同,在高峰出现前均呈现递增趋势.高、中、低3个浓度rhIL-12分别诱导健康人PBMC产生的IFN-γ水平与浓度之间呈显著量效关系,且在 0.1 ng/mL的极低浓度即可诱生高水平IFN-γ.结论 rhIL-12供试品生物活性良好,与国际标准品比对基本一致,不同人群对rhIL-12的应答高峰存在个体差异,以诱生IFN-γ作为评价rhIL-12生物活性的指标具有明显的量效关系.
목적 건립중조인백세포개소12(rhIL-12)적생물활성검측방법 ,관찰rhIL-12유도건강인외주혈단개핵세포(PBMC)산생γ간우소(IFN-γ)적수평여제량화시간지간적관계,게시기변화규률.방법 rhIL-12공시품자격건강인PBMC분비IFN-γ,경국제표준품교정,건립rhIL-12생물활성측정방법 .이1 ng/mL농도rhIL-12유도건강인PBMC,분별우24、48、72、96화120 h 5개시간점용매련면역흡부시험(ELISA)측정배양상청적IFN-γ수평.측정0.1、0.5화2.5 ng/mL 3개농도rhIL-12유도인PBMC 72 h후배양상청적IFN-γ수평, 용Prism 5.0통계연건적중복측량방차분석법대소득수거진행통계학처리.결과 rhIL-12공시품적생물활성곡선정전형S형,IFN-γ함량위최대농도일반시적공시품농도(ED50)위(1.008±0.238) ng/mL,공시품rhIL-12효개위7 938 IU/mL.측정1 ng/mL농도rhIL-12자격건강인PBMC후5개시간점배양상청중IFN-γ현시,불동개체고봉출현시간유소불동,재고봉출현전균정현체증추세.고、중、저3개농도rhIL-12분별유도건강인PBMC산생적IFN-γ수평여농도지간정현저량효관계,차재 0.1 ng/mL적겁저농도즉가유생고수평IFN-γ.결론 rhIL-12공시품생물활성량호,여국제표준품비대기본일치,불동인군대rhIL-12적응답고봉존재개체차이,이유생IFN-γ작위평개rhIL-12생물활성적지표구유명현적량효관계.