扬州大学学报(农业与生命科学版)
颺州大學學報(農業與生命科學版)
양주대학학보(농업여생명과학판)
JOURNAL OF YANGZHOU UNIVERSITY(AGRICULTURAL AND LIFE SCIENCES EDITION)
2011年
1期
55-58
,共4页
张鑫宇%孙怀昌%刘文俊%夏晓莉%成大荣
張鑫宇%孫懷昌%劉文俊%夏曉莉%成大榮
장흠우%손부창%류문준%하효리%성대영
纳米金探针%非洲猪瘟病毒%p72基因%检测%银染增强
納米金探針%非洲豬瘟病毒%p72基因%檢測%銀染增彊
납미금탐침%비주저온병독%p72기인%검측%은염증강
对22株发表的非洲猪瘟病毒(ASFV)p72基因序列进行比较,找出其中的高保守性区域,各设计、合成1条与保守区域互补的5′生物索标记及3′烷巯基修饰短链寡核苷酸探针,并将烷巯基修饰的探针吸附到纳米金颗粒上,制备纳米金标记探针.PCR扩增出的p72基因中的651 bp保守核酸序列,变性后与上述生物素探针及标记纳米金探针进行杂交,杂交产物加入吸附链霉亲和素的酶标板,利用亲和原理,捕获杂交产物,银染增强法对纳米金标记探针进行信号放大.结果表明:制备的纳米金探针经银染放大后,在酶标板中形成肉眼可见的黑色沉淀,可有效检测扩增出的p72基因,检测核酸浓度达到10 fmol·L-1,可用于ASFV快速诊断.
對22株髮錶的非洲豬瘟病毒(ASFV)p72基因序列進行比較,找齣其中的高保守性區域,各設計、閤成1條與保守區域互補的5′生物索標記及3′烷巰基脩飾短鏈寡覈苷痠探針,併將烷巰基脩飾的探針吸附到納米金顆粒上,製備納米金標記探針.PCR擴增齣的p72基因中的651 bp保守覈痠序列,變性後與上述生物素探針及標記納米金探針進行雜交,雜交產物加入吸附鏈黴親和素的酶標闆,利用親和原理,捕穫雜交產物,銀染增彊法對納米金標記探針進行信號放大.結果錶明:製備的納米金探針經銀染放大後,在酶標闆中形成肉眼可見的黑色沉澱,可有效檢測擴增齣的p72基因,檢測覈痠濃度達到10 fmol·L-1,可用于ASFV快速診斷.
대22주발표적비주저온병독(ASFV)p72기인서렬진행비교,조출기중적고보수성구역,각설계、합성1조여보수구역호보적5′생물색표기급3′완구기수식단련과핵감산탐침,병장완구기수식적탐침흡부도납미금과립상,제비납미금표기탐침.PCR확증출적p72기인중적651 bp보수핵산서렬,변성후여상술생물소탐침급표기납미금탐침진행잡교,잡교산물가입흡부련매친화소적매표판,이용친화원리,포획잡교산물,은염증강법대납미금표기탐침진행신호방대.결과표명:제비적납미금탐침경은염방대후,재매표판중형성육안가견적흑색침정,가유효검측확증출적p72기인,검측핵산농도체도10 fmol·L-1,가용우ASFV쾌속진단.
