热带作物学报
熱帶作物學報
열대작물학보
CHINESE JOURNAL OF TROPICAL CROPS
2012年
3期
459-466
,共8页
朱海生%陈敏氡%李严曼%温庆放
硃海生%陳敏氡%李嚴曼%溫慶放
주해생%진민동%리엄만%온경방
草莓%NCED%表达载体%RNA干扰
草莓%NCED%錶達載體%RNA榦擾
초매%NCED%표체재체%RNA간우
根据草莓(Fragaria ananassa Duch)NCED基因序列(GenBank:HQ399498),克隆NCED基因开放阅读框,将该片段插入植物表达载体pBI 121的CaMV 35S启动子和NOS终止子之间,构建了正义表达载体pBI 121NCED.克隆NCED基因正义、反义片段和作为内含子的gusA基因片段,以植物表达载体pBI 121为基础,以pCAMBIA2301作为中间载体,通过多次酶切和连接,成功构建了草莓NCED基因RNAi表达载体pBI121NCEDRNAi和反义表达载体pBI 121NCEDF.经PCR、限制性内切酶酶切和测序鉴定后,成功将pBI 121NCED、pBI 121NCEDF和pBI 121NCEDRNA 3个重组表达质粒导入农杆菌EHA105中.研究结果为进一步研究草莓NCED基因的功能奠定了基础.
根據草莓(Fragaria ananassa Duch)NCED基因序列(GenBank:HQ399498),剋隆NCED基因開放閱讀框,將該片段插入植物錶達載體pBI 121的CaMV 35S啟動子和NOS終止子之間,構建瞭正義錶達載體pBI 121NCED.剋隆NCED基因正義、反義片段和作為內含子的gusA基因片段,以植物錶達載體pBI 121為基礎,以pCAMBIA2301作為中間載體,通過多次酶切和連接,成功構建瞭草莓NCED基因RNAi錶達載體pBI121NCEDRNAi和反義錶達載體pBI 121NCEDF.經PCR、限製性內切酶酶切和測序鑒定後,成功將pBI 121NCED、pBI 121NCEDF和pBI 121NCEDRNA 3箇重組錶達質粒導入農桿菌EHA105中.研究結果為進一步研究草莓NCED基因的功能奠定瞭基礎.
근거초매(Fragaria ananassa Duch)NCED기인서렬(GenBank:HQ399498),극륭NCED기인개방열독광,장해편단삽입식물표체재체pBI 121적CaMV 35S계동자화NOS종지자지간,구건료정의표체재체pBI 121NCED.극륭NCED기인정의、반의편단화작위내함자적gusA기인편단,이식물표체재체pBI 121위기출,이pCAMBIA2301작위중간재체,통과다차매절화련접,성공구건료초매NCED기인RNAi표체재체pBI121NCEDRNAi화반의표체재체pBI 121NCEDF.경PCR、한제성내절매매절화측서감정후,성공장pBI 121NCED、pBI 121NCEDF화pBI 121NCEDRNA 3개중조표체질립도입농간균EHA105중.연구결과위진일보연구초매NCED기인적공능전정료기출.
