中国实验动物学报
中國實驗動物學報
중국실험동물학보
ACTA LABORATORIUM ANIMALIS SCIENTIA SINICA
2003年
1期
5-6
,共2页
吕茂民%贾莉玮%王建国%杨姝%熊景峰%章金刚
呂茂民%賈莉瑋%王建國%楊姝%熊景峰%章金剛
려무민%가리위%왕건국%양주%웅경봉%장금강
G418抗性%HEK293细胞%猪内源性反转录病毒%细胞模型
G418抗性%HEK293細胞%豬內源性反轉錄病毒%細胞模型
G418항성%HEK293세포%저내원성반전록병독%세포모형
目的培育具有G418抗性的HEK293细胞,用于建立猪内源性反转录病毒感染人HEK293细胞的模型.方法通过脂质体转染的方法,将含有neo基因的质粒pIRESneo导入HEK293细胞中,利用G418的选择特性,对转染细胞进行压力筛选,并对其进行了PCR鉴定.结果经600μg/ml的G418压力筛选后,获得了抗性细胞克隆.抗性细胞的形态和生长速度与筛选前细胞没有差异,特异性核苷酸引物检测抗性细胞基因组DNA,可以扩增出对应的核苷酸片段.结论成功地培育了G418抗性HEK293细胞,为建立猪内源性反转录病毒感染人HEK293细胞的模型奠定了基础.
目的培育具有G418抗性的HEK293細胞,用于建立豬內源性反轉錄病毒感染人HEK293細胞的模型.方法通過脂質體轉染的方法,將含有neo基因的質粒pIRESneo導入HEK293細胞中,利用G418的選擇特性,對轉染細胞進行壓力篩選,併對其進行瞭PCR鑒定.結果經600μg/ml的G418壓力篩選後,穫得瞭抗性細胞剋隆.抗性細胞的形態和生長速度與篩選前細胞沒有差異,特異性覈苷痠引物檢測抗性細胞基因組DNA,可以擴增齣對應的覈苷痠片段.結論成功地培育瞭G418抗性HEK293細胞,為建立豬內源性反轉錄病毒感染人HEK293細胞的模型奠定瞭基礎.
목적배육구유G418항성적HEK293세포,용우건립저내원성반전록병독감염인HEK293세포적모형.방법통과지질체전염적방법,장함유neo기인적질립pIRESneo도입HEK293세포중,이용G418적선택특성,대전염세포진행압력사선,병대기진행료PCR감정.결과경600μg/ml적G418압력사선후,획득료항성세포극륭.항성세포적형태화생장속도여사선전세포몰유차이,특이성핵감산인물검측항성세포기인조DNA,가이확증출대응적핵감산편단.결론성공지배육료G418항성HEK293세포,위건립저내원성반전록병독감염인HEK293세포적모형전정료기출.