广东畜牧兽医科技
廣東畜牧獸醫科技
엄동축목수의과기
GUANDONG JOURNAL OF ANIMAL AND VETERINARY SCIENCE
2006年
3期
35-37
,共3页
谢青梅%王敬师%李少璃%陈丽%马静云%曹永长%毕英佐
謝青梅%王敬師%李少璃%陳麗%馬靜雲%曹永長%畢英佐
사청매%왕경사%리소리%진려%마정운%조영장%필영좌
H5、H9亚型禽流感病毒%新城疫病毒%多重RT-PCR技术
H5、H9亞型禽流感病毒%新城疫病毒%多重RT-PCR技術
H5、H9아형금류감병독%신성역병독%다중RT-PCR기술
根据Genbank注册发表的H5、H9亚型禽流感病毒(AIV)的HA基因和新城疫病毒(NDV)的HA基因序列,设计多对引物,每种病毒各筛选出一对特异性好、灵敏度高的引物,其中FP1/FP2扩增H5亚型AIV HA基因片断长为545 bp;P3/P4扩增H9亚型AIV HA基因片断长为321 bp;P11/P22扩增NDV HA基因片断长为672 bp.用RT-PCR方法,通过特异性试验、灵敏度试验,H5、H9亚型AIV和NDV引物的灵敏度分别达到了1:104、1:108、1:104稀释度,与传染性支气管炎(IB)、传染性法氏囊病(IBD)、传染性喉气管炎(ILTV)、传染性鼻炎(IC)、霉形体(MS)、H1N1猪流感等抗原无交叉反应.实验结果表明,本研究建立了检测H5、H9亚型AIV和NDV的多重RT-PCR方法,混合引物的最佳退火温度为50℃,鉴定检测仅需4小时.
根據Genbank註冊髮錶的H5、H9亞型禽流感病毒(AIV)的HA基因和新城疫病毒(NDV)的HA基因序列,設計多對引物,每種病毒各篩選齣一對特異性好、靈敏度高的引物,其中FP1/FP2擴增H5亞型AIV HA基因片斷長為545 bp;P3/P4擴增H9亞型AIV HA基因片斷長為321 bp;P11/P22擴增NDV HA基因片斷長為672 bp.用RT-PCR方法,通過特異性試驗、靈敏度試驗,H5、H9亞型AIV和NDV引物的靈敏度分彆達到瞭1:104、1:108、1:104稀釋度,與傳染性支氣管炎(IB)、傳染性法氏囊病(IBD)、傳染性喉氣管炎(ILTV)、傳染性鼻炎(IC)、黴形體(MS)、H1N1豬流感等抗原無交扠反應.實驗結果錶明,本研究建立瞭檢測H5、H9亞型AIV和NDV的多重RT-PCR方法,混閤引物的最佳退火溫度為50℃,鑒定檢測僅需4小時.
근거Genbank주책발표적H5、H9아형금류감병독(AIV)적HA기인화신성역병독(NDV)적HA기인서렬,설계다대인물,매충병독각사선출일대특이성호、령민도고적인물,기중FP1/FP2확증H5아형AIV HA기인편단장위545 bp;P3/P4확증H9아형AIV HA기인편단장위321 bp;P11/P22확증NDV HA기인편단장위672 bp.용RT-PCR방법,통과특이성시험、령민도시험,H5、H9아형AIV화NDV인물적령민도분별체도료1:104、1:108、1:104희석도,여전염성지기관염(IB)、전염성법씨낭병(IBD)、전염성후기관염(ILTV)、전염성비염(IC)、매형체(MS)、H1N1저류감등항원무교차반응.실험결과표명,본연구건립료검측H5、H9아형AIV화NDV적다중RT-PCR방법,혼합인물적최가퇴화온도위50℃,감정검측부수4소시.
