中国兽医科学
中國獸醫科學
중국수의과학
VETERINARY SCIENCE IN CHINA
2007年
6期
477-481
,共5页
张福良%宋长绪%朱道中%徐维加
張福良%宋長緒%硃道中%徐維加
장복량%송장서%주도중%서유가
猪圆环病毒1型%实时荧光定量PCR%TaqMan探针
豬圓環病毒1型%實時熒光定量PCR%TaqMan探針
저원배병독1형%실시형광정량PCR%TaqMan탐침
采用PCR方法克隆了猪圆环病毒1型(PCV1)ORF2基因,构建了重组质粒pMD-ORF2并将其作为标准阳性模板.通过对反应条件进行优化,以定量的10倍系列稀释的质粒pMD-ORF2为标准品进行荧光定量PCR扩增,建立了检测PCV1的荧光定量PCR方法.结果显示,该方法的检测灵敏度可达1.0×101拷贝/μL;对起始浓度为1.0×107、1.0×106、1.0×105拷贝/μL标准品的最终实际测得值分别为1.001×107、0.869×106和0.988×105拷贝/μL,变异系数分别为4.758%、1.865%和3.836%.表明,此方法具有良好的准确性和重现性.
採用PCR方法剋隆瞭豬圓環病毒1型(PCV1)ORF2基因,構建瞭重組質粒pMD-ORF2併將其作為標準暘性模闆.通過對反應條件進行優化,以定量的10倍繫列稀釋的質粒pMD-ORF2為標準品進行熒光定量PCR擴增,建立瞭檢測PCV1的熒光定量PCR方法.結果顯示,該方法的檢測靈敏度可達1.0×101拷貝/μL;對起始濃度為1.0×107、1.0×106、1.0×105拷貝/μL標準品的最終實際測得值分彆為1.001×107、0.869×106和0.988×105拷貝/μL,變異繫數分彆為4.758%、1.865%和3.836%.錶明,此方法具有良好的準確性和重現性.
채용PCR방법극륭료저원배병독1형(PCV1)ORF2기인,구건료중조질립pMD-ORF2병장기작위표준양성모판.통과대반응조건진행우화,이정량적10배계렬희석적질립pMD-ORF2위표준품진행형광정량PCR확증,건립료검측PCV1적형광정량PCR방법.결과현시,해방법적검측령민도가체1.0×101고패/μL;대기시농도위1.0×107、1.0×106、1.0×105고패/μL표준품적최종실제측득치분별위1.001×107、0.869×106화0.988×105고패/μL,변이계수분별위4.758%、1.865%화3.836%.표명,차방법구유량호적준학성화중현성.
