中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2008年
7期
644-646,650
,共4页
猪囊尾蚴%免疫学筛选%克隆%表达%鉴定
豬囊尾蚴%免疫學篩選%剋隆%錶達%鑒定
저낭미유%면역학사선%극륭%표체%감정
目的 从猪囊尾蚴cDNA文库中免疫学筛选阳性蛋白的编码基因.以期获得囊尾蚴病新的免疫学诊断候选分子.方法 免疫学筛选cDNA文库,用PCR法扩增出猪囊尾蚴候选蛋白基因编码序列,T载体连接,鉴定后将其亚克隆入pET28a(+)载体中.经酶切、测序证实正确后.转化入大肠杆菌BL21并用IPTG对该重组菌诱导表达.SDS-PAGE和Westernblot方法观察表达结果.结果 通过cDNA文库免疫筛选、测序和EXPASY软件分析,其一个684bp ORF DNA序列为新基因(命名为Tsl).录入号为EU009656;将Tsl基因克隆入pET28a(+)载体中诱导表达,可得到一分子量约28.0kDa融合蛋白,并能被囊尾蚴病人血清识别.结论 本试验成功筛选、克隆出一个新囊尾蚴编码基因.并在原核细胞中表达,为进一步验证其免疫诊断价值奠定了基础.
目的 從豬囊尾蚴cDNA文庫中免疫學篩選暘性蛋白的編碼基因.以期穫得囊尾蚴病新的免疫學診斷候選分子.方法 免疫學篩選cDNA文庫,用PCR法擴增齣豬囊尾蚴候選蛋白基因編碼序列,T載體連接,鑒定後將其亞剋隆入pET28a(+)載體中.經酶切、測序證實正確後.轉化入大腸桿菌BL21併用IPTG對該重組菌誘導錶達.SDS-PAGE和Westernblot方法觀察錶達結果.結果 通過cDNA文庫免疫篩選、測序和EXPASY軟件分析,其一箇684bp ORF DNA序列為新基因(命名為Tsl).錄入號為EU009656;將Tsl基因剋隆入pET28a(+)載體中誘導錶達,可得到一分子量約28.0kDa融閤蛋白,併能被囊尾蚴病人血清識彆.結論 本試驗成功篩選、剋隆齣一箇新囊尾蚴編碼基因.併在原覈細胞中錶達,為進一步驗證其免疫診斷價值奠定瞭基礎.
목적 종저낭미유cDNA문고중면역학사선양성단백적편마기인.이기획득낭미유병신적면역학진단후선분자.방법 면역학사선cDNA문고,용PCR법확증출저낭미유후선단백기인편마서렬,T재체련접,감정후장기아극륭입pET28a(+)재체중.경매절、측서증실정학후.전화입대장간균BL21병용IPTG대해중조균유도표체.SDS-PAGE화Westernblot방법관찰표체결과.결과 통과cDNA문고면역사선、측서화EXPASY연건분석,기일개684bp ORF DNA서렬위신기인(명명위Tsl).록입호위EU009656;장Tsl기인극륭입pET28a(+)재체중유도표체,가득도일분자량약28.0kDa융합단백,병능피낭미유병인혈청식별.결론 본시험성공사선、극륭출일개신낭미유편마기인.병재원핵세포중표체,위진일보험증기면역진단개치전정료기출.
