东北农业大学学报
東北農業大學學報
동북농업대학학보
JOURNAL OF NORTHEAST AGRICULTURAL UNIVERSITY
2008年
8期
104-109
,共6页
佟慧丽%尹德云%李庆章%高学军
佟慧麗%尹德雲%李慶章%高學軍
동혜려%윤덕운%리경장%고학군
奶山羊%乳腺上皮细胞%细胞系
奶山羊%乳腺上皮細胞%細胞繫
내산양%유선상피세포%세포계
乳腺上皮细胞系的建立为乳蛋白基因表达调控机制的研究及乳腺表达载体,的检测提供有利条件.本研究建立了正常培养的奶山羊乳腺上皮细胞系.利用胶原酶和透明质酸消化法从奶山羊乳腺组织中分离并获得了纯化的乳腺上皮细胞,利用细胞角蛋白18的免疫荧光染色对乳腺上皮细胞进行了鉴定.通过细胞生长曲线、群体倍增时间、细胞接种存活率、细胞活力检测等生物学性状的检测建立并鉴定了奶山羊乳腺上皮细胞系.结果表明,奶山羊乳腺上皮细胞在添加表皮生长因子、胰岛素样生长因子-1、转铁蛋白-硒钠、10%胎牛血清的DF12培养液中生长状态良好,细胞传至30代时仍保持旺盛的增殖活力.通过细胞传代及反复冻存和复苏实现了细胞系的长期保存,建立了乳腺上皮细胞系,获得了大量的乳腺上皮细胞.从而为开展奶山羊、奶牛等产奶动物乳腺生物反应器及泌乳机制的研究提供了便利条件.
乳腺上皮細胞繫的建立為乳蛋白基因錶達調控機製的研究及乳腺錶達載體,的檢測提供有利條件.本研究建立瞭正常培養的奶山羊乳腺上皮細胞繫.利用膠原酶和透明質痠消化法從奶山羊乳腺組織中分離併穫得瞭純化的乳腺上皮細胞,利用細胞角蛋白18的免疫熒光染色對乳腺上皮細胞進行瞭鑒定.通過細胞生長麯線、群體倍增時間、細胞接種存活率、細胞活力檢測等生物學性狀的檢測建立併鑒定瞭奶山羊乳腺上皮細胞繫.結果錶明,奶山羊乳腺上皮細胞在添加錶皮生長因子、胰島素樣生長因子-1、轉鐵蛋白-硒鈉、10%胎牛血清的DF12培養液中生長狀態良好,細胞傳至30代時仍保持旺盛的增殖活力.通過細胞傳代及反複凍存和複囌實現瞭細胞繫的長期保存,建立瞭乳腺上皮細胞繫,穫得瞭大量的乳腺上皮細胞.從而為開展奶山羊、奶牛等產奶動物乳腺生物反應器及泌乳機製的研究提供瞭便利條件.
유선상피세포계적건립위유단백기인표체조공궤제적연구급유선표체재체,적검측제공유리조건.본연구건립료정상배양적내산양유선상피세포계.이용효원매화투명질산소화법종내산양유선조직중분리병획득료순화적유선상피세포,이용세포각단백18적면역형광염색대유선상피세포진행료감정.통과세포생장곡선、군체배증시간、세포접충존활솔、세포활력검측등생물학성상적검측건립병감정료내산양유선상피세포계.결과표명,내산양유선상피세포재첨가표피생장인자、이도소양생장인자-1、전철단백-서납、10%태우혈청적DF12배양액중생장상태량호,세포전지30대시잉보지왕성적증식활력.통과세포전대급반복동존화복소실현료세포계적장기보존,건립료유선상피세포계,획득료대량적유선상피세포.종이위개전내산양、내우등산내동물유선생물반응기급비유궤제적연구제공료편리조건.