感染、炎症、修复
感染、炎癥、脩複
감염、염증、수복
INFECTION， INFLAMMATION， REPAIR
2008年
4期
206-209,封2
,共5页
刘铮%徐佳%伍丽琼%王娟%邓鹏%姜勇
劉錚%徐佳%伍麗瓊%王娟%鄧鵬%薑勇
류쟁%서가%오려경%왕연%산붕%강용
髓样相关蛋白14%血凝素%细胞内定位%载体构建
髓樣相關蛋白14%血凝素%細胞內定位%載體構建
수양상관단백14%혈응소%세포내정위%재체구건
目的:构建小鼠髓样相关蛋白14(MRP14)的真核表达载体,观察其在NIH3T3细胞中的表达定位情况.方法:提取BALB/c小鼠肝脏组织的总RNA,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增得到MRP14编码序列.然后将该编码序列克隆到带有血凝素(HA)标记的载体pcDNA3-HA上,随后转染NIH3T3细胞,在荧光显微镜下观察结果.结果:重组质粒经聚合酶链反应(PCR)、酶切和测序鉴定证明构建正确.转染实验发现,该质粒能够在NIH3T3细胞中表达,表达产物主要定位在细胞质中.结论:成功构建带HA标签的MRP14真核表达载体.该载体能在哺乳动物细胞中有效表达并正确定位,为下一步深入研究MRP14作用细胞的信号通路提供了一个重要工具.
目的:構建小鼠髓樣相關蛋白14(MRP14)的真覈錶達載體,觀察其在NIH3T3細胞中的錶達定位情況.方法:提取BALB/c小鼠肝髒組織的總RNA,通過逆轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)擴增得到MRP14編碼序列.然後將該編碼序列剋隆到帶有血凝素(HA)標記的載體pcDNA3-HA上,隨後轉染NIH3T3細胞,在熒光顯微鏡下觀察結果.結果:重組質粒經聚閤酶鏈反應(PCR)、酶切和測序鑒定證明構建正確.轉染實驗髮現,該質粒能夠在NIH3T3細胞中錶達,錶達產物主要定位在細胞質中.結論:成功構建帶HA標籤的MRP14真覈錶達載體.該載體能在哺乳動物細胞中有效錶達併正確定位,為下一步深入研究MRP14作用細胞的信號通路提供瞭一箇重要工具.
목적:구건소서수양상관단백14(MRP14)적진핵표체재체,관찰기재NIH3T3세포중적표체정위정황.방법:제취BALB/c소서간장조직적총RNA,통과역전록-취합매련반응(RT-PCR)확증득도MRP14편마서렬.연후장해편마서렬극륭도대유혈응소(HA)표기적재체pcDNA3-HA상,수후전염NIH3T3세포,재형광현미경하관찰결과.결과:중조질립경취합매련반응(PCR)、매절화측서감정증명구건정학.전염실험발현,해질립능구재NIH3T3세포중표체,표체산물주요정위재세포질중.결론:성공구건대HA표첨적MRP14진핵표체재체.해재체능재포유동물세포중유효표체병정학정위,위하일보심입연구MRP14작용세포적신호통로제공료일개중요공구.
