共表达p53及siRNA-VEGF质粒的构建及其在PC-3细胞中的表达
공표체p53급siRNA-VEGF질립적구건급기재PC-3세포중적표체
Construction and identification of vectors encoding both wide type p53 protein and siRNA-VEGF on PC-3 cells
  • 万方数据
    中国实验诊断学 중국실험진단학
    CHINESE JOURNAL OF LABORATORY DIAGNOSIS
    2010年 3期 337-340 ,共4页

    刘亚男%邵月婷%赵丹%汲坤%李晓洁%邵晨%王波%张爽%李馨%李扬%赵雪俭

    류아남%소월정%조단%급곤%리효길%소신%왕파%장상%리형%리양%조설검

    p53%VEGF%RNAi%前列腺癌%质粒 p53%VEGF%RNAi%前列腺癌%質粒
    p53%VEGF%RNAi%전렬선암%질립
    目的 构建可同时表达野生型p53 (wt-p53)及siRNA-VEGF的重组真核表达载体用于激素非依赖性前列腺癌的联合基因治疗.方法 利用亚克隆、T-A克隆和PCR技术合成并构建pcDNA3.1-p53,siRNA-VEGF,p53/siRNA-VEGF及siRNA-scramble重组质粒.以脂质体法将上述重组质粒转染至PC-3细胞,PCR鉴定p53,VEGF基因的表达.结果 克隆出wt-p53全长及带有U6启动子的siRNA-VEGF序列,经DNA测序证实序列正确,通过连接成功构建上述五种真核重组表达载体.转染细胞48 h后可见GFP(siRNA-VEGF组)明显表达;RT-PCR检测到转染后PC-3细胞中 wt-p53表达增强,而VEGF表达下调.结论 p53/siRNA-VEGF共表达载体的构建及其在PC-3细胞中的表达为进一步研究wt-p53和VEGF双基因对人前列腺癌作用机制为治疗作用奠定了基础.
    목적 구건가동시표체야생형p53 (wt-p53)급siRNA-VEGF적중조진핵표체재체용우격소비의뢰성전렬선암적연합기인치료.방법 이용아극륭、T-A극륭화PCR기술합성병구건pcDNA3.1-p53,siRNA-VEGF,p53/siRNA-VEGF급siRNA-scramble중조질립.이지질체법장상술중조질립전염지PC-3세포,PCR감정p53,VEGF기인적표체.결과 극륭출wt-p53전장급대유U6계동자적siRNA-VEGF서렬,경DNA측서증실서렬정학,통과련접성공구건상술오충진핵중조표체재체.전염세포48 h후가견GFP(siRNA-VEGF조)명현표체;RT-PCR검측도전염후PC-3세포중 wt-p53표체증강,이VEGF표체하조.결론 p53/siRNA-VEGF공표체재체적구건급기재PC-3세포중적표체위진일보연구wt-p53화VEGF쌍기인대인전렬선암작용궤제위치료작용전정료기출.
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