热带作物学报
熱帶作物學報
열대작물학보
CHINESE JOURNAL OF TROPICAL CROPS
2010年
7期
1115-1119
,共5页
王小明%王健华%冯团诚%张雨良%吴育鹏%刘志昕
王小明%王健華%馮糰誠%張雨良%吳育鵬%劉誌昕
왕소명%왕건화%풍단성%장우량%오육붕%류지흔
黄瓜花叶病毒%2b基因%自激活%大肠杆菌双杂交
黃瓜花葉病毒%2b基因%自激活%大腸桿菌雙雜交
황과화협병독%2b기인%자격활%대장간균쌍잡교
2b蛋白是黄瓜花叶病毒与植物寄主相互作用的一种重要多功能蛋白.用PER方法扩增目的基因26,经酶切、连接将其克隆至带有λcI基因的pBT载体上,构建与λcI基因融合的表达载体pBT-CMV 2b,转化大肠杆菌XL1-Blue MRF'报告菌株,用IPTG诱导表达黄瓜花叶病毒26基因.Western blot分析结果表明,2b-λcI融合蛋白已成功表达,大小约为38 ku,与预期大小一致.pBT-CMV 2b与空质粒pTRG共转化XL1-Blue MRF'报告菌株,同时以pBT空质粒和pTRG-Gal11p共转化作为对照.结果显示,CMV 2b蛋白未产生自激活作用,从而为利用大肠杆菌双杂交系统筛选与2b蛋白相互作用的蛋白质研究奠定基础.
2b蛋白是黃瓜花葉病毒與植物寄主相互作用的一種重要多功能蛋白.用PER方法擴增目的基因26,經酶切、連接將其剋隆至帶有λcI基因的pBT載體上,構建與λcI基因融閤的錶達載體pBT-CMV 2b,轉化大腸桿菌XL1-Blue MRF'報告菌株,用IPTG誘導錶達黃瓜花葉病毒26基因.Western blot分析結果錶明,2b-λcI融閤蛋白已成功錶達,大小約為38 ku,與預期大小一緻.pBT-CMV 2b與空質粒pTRG共轉化XL1-Blue MRF'報告菌株,同時以pBT空質粒和pTRG-Gal11p共轉化作為對照.結果顯示,CMV 2b蛋白未產生自激活作用,從而為利用大腸桿菌雙雜交繫統篩選與2b蛋白相互作用的蛋白質研究奠定基礎.
2b단백시황과화협병독여식물기주상호작용적일충중요다공능단백.용PER방법확증목적기인26,경매절、련접장기극륭지대유λcI기인적pBT재체상,구건여λcI기인융합적표체재체pBT-CMV 2b,전화대장간균XL1-Blue MRF'보고균주,용IPTG유도표체황과화협병독26기인.Western blot분석결과표명,2b-λcI융합단백이성공표체,대소약위38 ku,여예기대소일치.pBT-CMV 2b여공질립pTRG공전화XL1-Blue MRF'보고균주,동시이pBT공질립화pTRG-Gal11p공전화작위대조.결과현시,CMV 2b단백미산생자격활작용,종이위이용대장간균쌍잡교계통사선여2b단백상호작용적단백질연구전정기출.
