华中科技大学学报(医学版)
華中科技大學學報(醫學版)
화중과기대학학보(의학판)
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINAE TONGJI
2011年
2期
178-182
,共5页
张志才%邵增务%熊蠡茗%车彪%邓超%杨述华
張誌纔%邵增務%熊蠡茗%車彪%鄧超%楊述華
장지재%소증무%웅려명%차표%산초%양술화
骨肉瘤%自噬%细胞凋亡%顺铂
骨肉瘤%自噬%細胞凋亡%順鉑
골육류%자서%세포조망%순박
目的 研究顺铂(DDP)诱导的骨肉瘤细胞自噬性活化,并探讨自噬与凋亡的关系.方法 利用免疫荧光染色和电镜观察DDP对骨肉瘤细胞自噬的影响;应用3-甲基腺嘌呤(3MA)下调自噬,采用MTT比色法,测定DDP对骨肉瘤细胞增殖抑制率的影响;MDC荧光染色和流式细胞术定量检测骨肉瘤细胞自噬的表达;应用流式细胞仪检测骨肉瘤细胞的凋亡情况.结果 DDP给药后可见LC3-Ⅱ绿色荧光呈点状散在分布于细胞膜附近.电镜下观察到DDP给药后骨肉瘤细胞内自噬体的形成.DDP能诱导自噬和凋亡的发生.3MA能抑制自噬的发生,对凋亡无明显影响.与单独DDP作用相比,3MA提前给药细胞的凋亡率增加,其细胞增殖抑制率也增高;3MA迟后给药细胞的凋亡率略有下降,其细胞增殖抑制率也下降.结论 DDP能诱导MG63细胞发生自噬性活化.DDP作用早期,自噬能延缓凋亡的发生,发挥保护细胞的作用;在DDP作用后期,自噬则作为另一种死亡形式出现,和凋亡一起促进细胞死亡.
目的 研究順鉑(DDP)誘導的骨肉瘤細胞自噬性活化,併探討自噬與凋亡的關繫.方法 利用免疫熒光染色和電鏡觀察DDP對骨肉瘤細胞自噬的影響;應用3-甲基腺嘌呤(3MA)下調自噬,採用MTT比色法,測定DDP對骨肉瘤細胞增殖抑製率的影響;MDC熒光染色和流式細胞術定量檢測骨肉瘤細胞自噬的錶達;應用流式細胞儀檢測骨肉瘤細胞的凋亡情況.結果 DDP給藥後可見LC3-Ⅱ綠色熒光呈點狀散在分佈于細胞膜附近.電鏡下觀察到DDP給藥後骨肉瘤細胞內自噬體的形成.DDP能誘導自噬和凋亡的髮生.3MA能抑製自噬的髮生,對凋亡無明顯影響.與單獨DDP作用相比,3MA提前給藥細胞的凋亡率增加,其細胞增殖抑製率也增高;3MA遲後給藥細胞的凋亡率略有下降,其細胞增殖抑製率也下降.結論 DDP能誘導MG63細胞髮生自噬性活化.DDP作用早期,自噬能延緩凋亡的髮生,髮揮保護細胞的作用;在DDP作用後期,自噬則作為另一種死亡形式齣現,和凋亡一起促進細胞死亡.
목적 연구순박(DDP)유도적골육류세포자서성활화,병탐토자서여조망적관계.방법 이용면역형광염색화전경관찰DDP대골육류세포자서적영향;응용3-갑기선표령(3MA)하조자서,채용MTT비색법,측정DDP대골육류세포증식억제솔적영향;MDC형광염색화류식세포술정량검측골육류세포자서적표체;응용류식세포의검측골육류세포적조망정황.결과 DDP급약후가견LC3-Ⅱ록색형광정점상산재분포우세포막부근.전경하관찰도DDP급약후골육류세포내자서체적형성.DDP능유도자서화조망적발생.3MA능억제자서적발생,대조망무명현영향.여단독DDP작용상비,3MA제전급약세포적조망솔증가,기세포증식억제솔야증고;3MA지후급약세포적조망솔략유하강,기세포증식억제솔야하강.결론 DDP능유도MG63세포발생자서성활화.DDP작용조기,자서능연완조망적발생,발휘보호세포적작용;재DDP작용후기,자서칙작위령일충사망형식출현,화조망일기촉진세포사망.