河北农业大学学报
河北農業大學學報
하북농업대학학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL UNIVERSITY OF HEBEI
2011年
5期
8-13
,共6页
陈佳平%孟涛%刘芬%于秀梅%赵伟全%刘大群
陳佳平%孟濤%劉芬%于秀梅%趙偉全%劉大群
진가평%맹도%류분%우수매%조위전%류대군
小麦%过敏性诱导反应蛋白2%基因克隆%载体构建
小麥%過敏性誘導反應蛋白2%基因剋隆%載體構建
소맥%과민성유도반응단백2%기인극륭%재체구건
通过基因枪介导法将小麦过敏性诱导反应蛋白2基因Ta-hir2转入小麦胚性愈伤组织中,经分化筛选后获得转基因小麦植株,为验证该基因的功能奠定基础.以接种非亲和叶锈菌小种05-19-43②的小麦‘TcLr15,为材料,采用同源克隆的策略克隆了小麦Ta-hir2基因；将该基因的编码区与植物表达载体pAHC-25相连,成功构建了重组转基因质粒Ta-hir2-pAHC-25；采用基因枪法将构建好的重组质粒转化小麦品种‘Thatcher,和‘TcLr15’的胚性愈伤组织,获得了再生植株；对再生植株提取基因组DNA后,进行PCR检测,经计算,PCR阳性率为4.76％,最终转化率为0.28％.
通過基因鎗介導法將小麥過敏性誘導反應蛋白2基因Ta-hir2轉入小麥胚性愈傷組織中,經分化篩選後穫得轉基因小麥植株,為驗證該基因的功能奠定基礎.以接種非親和葉鏽菌小種05-19-43②的小麥‘TcLr15,為材料,採用同源剋隆的策略剋隆瞭小麥Ta-hir2基因；將該基因的編碼區與植物錶達載體pAHC-25相連,成功構建瞭重組轉基因質粒Ta-hir2-pAHC-25；採用基因鎗法將構建好的重組質粒轉化小麥品種‘Thatcher,和‘TcLr15’的胚性愈傷組織,穫得瞭再生植株；對再生植株提取基因組DNA後,進行PCR檢測,經計算,PCR暘性率為4.76％,最終轉化率為0.28％.
통과기인창개도법장소맥과민성유도반응단백2기인Ta-hir2전입소맥배성유상조직중,경분화사선후획득전기인소맥식주,위험증해기인적공능전정기출.이접충비친화협수균소충05-19-43②적소맥‘TcLr15,위재료,채용동원극륭적책략극륭료소맥Ta-hir2기인；장해기인적편마구여식물표체재체pAHC-25상련,성공구건료중조전기인질립Ta-hir2-pAHC-25；채용기인창법장구건호적중조질립전화소맥품충‘Thatcher,화‘TcLr15’적배성유상조직,획득료재생식주；대재생식주제취기인조DNA후,진행PCR검측,경계산,PCR양성솔위4.76％,최종전화솔위0.28％.
