CAJ | 학술논문

本研究旨在观察绵羊卵丘细胞中组织蛋白酶( CTSS、CTSB)的mRNA在体外成熟过程中的表达规律,探明卵丘细胞中组织蛋白酶( CTSS、CTSB) mRNA的表达与卵母细胞体外发育能力之间的相关性.采用Real-time PCR方法检测绵羊在体外成熟0、8、16和24 h的卵丘细胞中组织蛋白酶(CTSB、CTSS)的mRNA表达水平,以及在成熟液中添加组织蛋白酶抑制剂(E-64)后卵丘细胞中CTSB和CTSS的mRNA表达量在体外成熟前及体外成熟后的表达水平,并测定在成熟液中添加1、5、10 μmol·L-1 E-64对卵母细胞成熟率、受精率及囊胚发育率的影响.结果,卵丘细胞中的CTSS和CTSB mRNA表达均随着体外成熟时间的增加(IVM 0 h、IVM 8 h和IVM 16 h)呈下降的趋势(P＜0.01).添加5和10 μmol· L-1 E-64组的卵丘细胞中CTSS和CTSB mRNA表达水平较对照组和1 μmol· L-1组均显著性降低(P＜0.01),而5和10μmol·L-1组间的CTSS和CTSB mRNA表达水平无显著差异(P＞0.05).成熟液中添加5和10 μmol·L-1的E-64组的囊胚发育率(26.82％和30.95％)显著高于1 μmol· L-1组和对照组(18.23％和15.63％,P＜0.05),但5和10 μmol·L-1组对卵母细胞的成熟率及卵裂率与1 μmol· L-1组和对照组间无显著性差异(P＞0.05).结果表明,绵羊卵丘细胞中CTSS和CTSB的mRNA表达水平在体外成熟过程中呈下降趋势,其mRNA表达水平与胚胎的发育能力呈负相关；组织蛋白酶特异性抑制剂E-64可下调绵羊卵丘细胞中CTSS和CTSB的mRNA表达水平,并提高卵母细胞随后的体外发育能力.
본연구지재관찰면양란구세포중조직단백매( CTSS、CTSB)적mRNA재체외성숙과정중적표체규률,탐명란구세포중조직단백매( CTSS、CTSB) mRNA적표체여란모세포체외발육능력지간적상관성.채용Real-time PCR방법검측면양재체외성숙0、8、16화24 h적란구세포중조직단백매(CTSB、CTSS)적mRNA표체수평,이급재성숙액중첨가조직단백매억제제(E-64)후란구세포중CTSB화CTSS적mRNA표체량재체외성숙전급체외성숙후적표체수평,병측정재성숙액중첨가1、5、10 μmol·L-1 E-64대란모세포성숙솔、수정솔급낭배발육솔적영향.결과,란구세포중적CTSS화CTSB mRNA표체균수착체외성숙시간적증가(IVM 0 h、IVM 8 h화IVM 16 h)정하강적추세(P＜0.01).첨가5화10 μmol· L-1 E-64조적란구세포중CTSS화CTSB mRNA표체수평교대조조화1 μmol· L-1조균현저성강저(P＜0.01),이5화10μmol·L-1조간적CTSS화CTSB mRNA표체수평무현저차이(P＞0.05).성숙액중첨가5화10 μmol·L-1적E-64조적낭배발육솔(26.82％화30.95％)현저고우1 μmol· L-1조화대조조(18.23％화15.63％,P＜0.05),단5화10 μmol·L-1조대란모세포적성숙솔급란렬솔여1 μmol· L-1조화대조조간무현저성차이(P＞0.05).결과표명,면양란구세포중CTSS화CTSB적mRNA표체수평재체외성숙과정중정하강추세,기mRNA표체수평여배태적발육능력정부상관；조직단백매특이성억제제E-64가하조면양란구세포중CTSS화CTSB적mRNA표체수평,병제고란모세포수후적체외발육능력.