检验医学与临床
檢驗醫學與臨床
검험의학여림상
JOURNAL OF LABORATORY MEDICINE AND CLINICAL SCIENCES
2012年
10期
1160-1162
,共3页
梁爱玲%刘勇军%侯敢%黄迪南
樑愛玲%劉勇軍%侯敢%黃迪南
량애령%류용군%후감%황적남
防御素%抗菌肽%扇贝%cDNA末端快速扩增聚合酶链反应%基因
防禦素%抗菌肽%扇貝%cDNA末耑快速擴增聚閤酶鏈反應%基因
방어소%항균태%선패%cDNA말단쾌속확증취합매련반응%기인
目的 应用改良5′cDNA末端快速扩增聚合酶链反应(RACE)筛选扇贝抗菌肽基因,寻找基于基因序列同源性的双壳类抗菌肽(AMP)的筛选方法.方法 TRIzol法提取扇贝血淋巴中总RNA.根据贻贝抗菌肽的保守序列设计基因特异性简并引物,进行改良5′ RACE钓取可能防御素基因cDNA的5′端序列、AT克隆、DNA测序和同源性分析.结果采用改良5′ RACE从扇贝血淋巴RNA中得到多个未知基因的cDNA 5′端序列,挑选600 bp以下的基因片段进行AT克隆和DNA测序后得到3个插入片段序列,其长度分别为257、275和511 bp.通过BLAST程序搜索GenBank核酸数据库,未发现与之高度同源的基因.结论从扇贝血淋巴中获得的3个5′端cDNA序列可能属于新的基因.应用改良5′ RACE能钓取含防御素保守序列的新基因片段,由此表明此方案具有可行性.
目的 應用改良5′cDNA末耑快速擴增聚閤酶鏈反應(RACE)篩選扇貝抗菌肽基因,尋找基于基因序列同源性的雙殼類抗菌肽(AMP)的篩選方法.方法 TRIzol法提取扇貝血淋巴中總RNA.根據貽貝抗菌肽的保守序列設計基因特異性簡併引物,進行改良5′ RACE釣取可能防禦素基因cDNA的5′耑序列、AT剋隆、DNA測序和同源性分析.結果採用改良5′ RACE從扇貝血淋巴RNA中得到多箇未知基因的cDNA 5′耑序列,挑選600 bp以下的基因片段進行AT剋隆和DNA測序後得到3箇插入片段序列,其長度分彆為257、275和511 bp.通過BLAST程序搜索GenBank覈痠數據庫,未髮現與之高度同源的基因.結論從扇貝血淋巴中穫得的3箇5′耑cDNA序列可能屬于新的基因.應用改良5′ RACE能釣取含防禦素保守序列的新基因片段,由此錶明此方案具有可行性.
목적 응용개량5′cDNA말단쾌속확증취합매련반응(RACE)사선선패항균태기인,심조기우기인서렬동원성적쌍각류항균태(AMP)적사선방법.방법 TRIzol법제취선패혈림파중총RNA.근거이패항균태적보수서렬설계기인특이성간병인물,진행개량5′ RACE조취가능방어소기인cDNA적5′단서렬、AT극륭、DNA측서화동원성분석.결과채용개량5′ RACE종선패혈림파RNA중득도다개미지기인적cDNA 5′단서렬,도선600 bp이하적기인편단진행AT극륭화DNA측서후득도3개삽입편단서렬,기장도분별위257、275화511 bp.통과BLAST정서수색GenBank핵산수거고,미발현여지고도동원적기인.결론종선패혈림파중획득적3개5′단cDNA서렬가능속우신적기인.응용개량5′ RACE능조취함방어소보수서렬적신기인편단,유차표명차방안구유가행성.
