生命科学研究
生命科學研究
생명과학연구
LIFE SCIENCE RESEARCH
2012年
3期
242-247
,共6页
王志强%梁锐%陈明清%邓俊%李文亮%陈天星%文政琦%杨军
王誌彊%樑銳%陳明清%鄧俊%李文亮%陳天星%文政琦%楊軍
왕지강%량예%진명청%산준%리문량%진천성%문정기%양군
人包皮成纤维细胞%原代培养%胰蛋白酶消化法%组织块法%饲养层%人胚胎干细胞
人包皮成纖維細胞%原代培養%胰蛋白酶消化法%組織塊法%飼養層%人胚胎榦細胞
인포피성섬유세포%원대배양%이단백매소화법%조직괴법%사양층%인배태간세포
小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)是目前国际上公认的人胚胎干细胞(hESCs)体外培养的饲养层细胞,但MEFs存在寿命短、动物源性污染等问题,需要探索适于hESCs体外培养且寿命长的人源性饲养层.采用胰蛋白酶消化法和组织块法分别原代培养人包皮成纤维细胞(hFFs),探索hFFs原代培养的最佳方法,为hFFs作为饲养层在hESCs研究中的应用提供可靠的科学依据;通过倒置显微镜下观察其生长状态和免疫细胞化学染色鉴定,结果显示两种原代培养方法获得的hFFs的形态及生物学特性均符合成纤维细胞;通过测定细胞生长曲线及MTT法检测,结果显示两种原代培养方法获得的不同代数的hFFs均具有较高的增殖活性,传代10余代仍能保持较好的细胞形态,可以制备成饲养层用于hESCs的研究.
小鼠胚胎成纖維細胞(MEFs)是目前國際上公認的人胚胎榦細胞(hESCs)體外培養的飼養層細胞,但MEFs存在壽命短、動物源性汙染等問題,需要探索適于hESCs體外培養且壽命長的人源性飼養層.採用胰蛋白酶消化法和組織塊法分彆原代培養人包皮成纖維細胞(hFFs),探索hFFs原代培養的最佳方法,為hFFs作為飼養層在hESCs研究中的應用提供可靠的科學依據;通過倒置顯微鏡下觀察其生長狀態和免疫細胞化學染色鑒定,結果顯示兩種原代培養方法穫得的hFFs的形態及生物學特性均符閤成纖維細胞;通過測定細胞生長麯線及MTT法檢測,結果顯示兩種原代培養方法穫得的不同代數的hFFs均具有較高的增殖活性,傳代10餘代仍能保持較好的細胞形態,可以製備成飼養層用于hESCs的研究.
소서배태성섬유세포(MEFs)시목전국제상공인적인배태간세포(hESCs)체외배양적사양층세포,단MEFs존재수명단、동물원성오염등문제,수요탐색괄우hESCs체외배양차수명장적인원성사양층.채용이단백매소화법화조직괴법분별원대배양인포피성섬유세포(hFFs),탐색hFFs원대배양적최가방법,위hFFs작위사양층재hESCs연구중적응용제공가고적과학의거;통과도치현미경하관찰기생장상태화면역세포화학염색감정,결과현시량충원대배양방법획득적hFFs적형태급생물학특성균부합성섬유세포;통과측정세포생장곡선급MTT법검측,결과현시량충원대배양방법획득적불동대수적hFFs균구유교고적증식활성,전대10여대잉능보지교호적세포형태,가이제비성사양층용우hESCs적연구.
