中国药科大学学报
中國藥科大學學報
중국약과대학학보
JOURNAL OF CHINA PHARMACEUTICAL UNIVERSITY
2005年
4期
378-380
,共3页
杨毅刚%周长林%窦洁%陈新
楊毅剛%週長林%竇潔%陳新
양의강%주장림%두길%진신
脱氢奎尼酸合成酶%生物合成%克隆与表达%奎尼酸
脫氫奎尼痠閤成酶%生物閤成%剋隆與錶達%奎尼痠
탈경규니산합성매%생물합성%극륭여표체%규니산
目的:在大肠杆菌中高效表达脱氢奎尼酸合成酶.方法:以大肠杆菌基因组为模板,采用PCR扩增得到脱氢奎尼酸合成酶基因aroB,并在大肠杆菌中进行表达.结果:在浓度为0.5 mmol/L的IPTG诱导4 h后aroB基因表达量占菌体总可溶性蛋白40.0%,SDS-PAGE显示重组菌诱导后表达的脱氢奎尼酸合成酶蛋白分子量约为38 kDa,发酵液中脱氢奎尼酸合成酶的酶活力达到178 U/L,为宿主菌的35.6倍.结论:脱氢奎尼酸合成酶在大肠杆菌中实现了高效表达.
目的:在大腸桿菌中高效錶達脫氫奎尼痠閤成酶.方法:以大腸桿菌基因組為模闆,採用PCR擴增得到脫氫奎尼痠閤成酶基因aroB,併在大腸桿菌中進行錶達.結果:在濃度為0.5 mmol/L的IPTG誘導4 h後aroB基因錶達量佔菌體總可溶性蛋白40.0%,SDS-PAGE顯示重組菌誘導後錶達的脫氫奎尼痠閤成酶蛋白分子量約為38 kDa,髮酵液中脫氫奎尼痠閤成酶的酶活力達到178 U/L,為宿主菌的35.6倍.結論:脫氫奎尼痠閤成酶在大腸桿菌中實現瞭高效錶達.
목적:재대장간균중고효표체탈경규니산합성매.방법:이대장간균기인조위모판,채용PCR확증득도탈경규니산합성매기인aroB,병재대장간균중진행표체.결과:재농도위0.5 mmol/L적IPTG유도4 h후aroB기인표체량점균체총가용성단백40.0%,SDS-PAGE현시중조균유도후표체적탈경규니산합성매단백분자량약위38 kDa,발효액중탈경규니산합성매적매활력체도178 U/L,위숙주균적35.6배.결론:탈경규니산합성매재대장간균중실현료고효표체.
