山东大学学报（医学版）
山東大學學報（醫學版）
산동대학학보（의학판）
JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY(HEALTH SCIENCES)
2005年
7期
567-569,588
,共4页
康鲁东%崔福爱%吴伟芳%胡晓燕%姜安丽%孔峰%于清水
康魯東%崔福愛%吳偉芳%鬍曉燕%薑安麗%孔峰%于清水
강로동%최복애%오위방%호효연%강안려%공봉%우청수
前列腺肿瘤%前列腺特异性膜抗原%启动子%荧光素酶
前列腺腫瘤%前列腺特異性膜抗原%啟動子%熒光素酶
전렬선종류%전렬선특이성막항원%계동자%형광소매
目的:构建含人前列腺特异性膜抗原(prostate specific membrane antigen,PSMA)基因启动子表达载体pGL3-PSMP.方法:PCR扩增人PSMA上游1 175 bp启动子序列,克隆至荧光素酶表达载体pGL3-Basic,构建前列腺特异性表达载体pGL3-PSMP,重组子经双酶切、测序鉴定.将构建载体用脂质体转染体外培养的前列腺癌细胞株PC-3M,应用双荧光素酶测定系统检测荧光素酶的表达活性.结果:序列测定表明,克隆获得的1 175 bp的DNA序列与GenBank报道的一致,且插入方向正确.含人PSMA基因启动子的报告基因荧光素酶的表达活性显著提高,比pGL3-Basic高10倍多.结论:成功构建了含人PSMA基因启动子的荧光素酶表达载体.
目的:構建含人前列腺特異性膜抗原(prostate specific membrane antigen,PSMA)基因啟動子錶達載體pGL3-PSMP.方法:PCR擴增人PSMA上遊1 175 bp啟動子序列,剋隆至熒光素酶錶達載體pGL3-Basic,構建前列腺特異性錶達載體pGL3-PSMP,重組子經雙酶切、測序鑒定.將構建載體用脂質體轉染體外培養的前列腺癌細胞株PC-3M,應用雙熒光素酶測定繫統檢測熒光素酶的錶達活性.結果:序列測定錶明,剋隆穫得的1 175 bp的DNA序列與GenBank報道的一緻,且插入方嚮正確.含人PSMA基因啟動子的報告基因熒光素酶的錶達活性顯著提高,比pGL3-Basic高10倍多.結論:成功構建瞭含人PSMA基因啟動子的熒光素酶錶達載體.
목적:구건함인전렬선특이성막항원(prostate specific membrane antigen,PSMA)기인계동자표체재체pGL3-PSMP.방법:PCR확증인PSMA상유1 175 bp계동자서렬,극륭지형광소매표체재체pGL3-Basic,구건전렬선특이성표체재체pGL3-PSMP,중조자경쌍매절、측서감정.장구건재체용지질체전염체외배양적전렬선암세포주PC-3M,응용쌍형광소매측정계통검측형광소매적표체활성.결과:서렬측정표명,극륭획득적1 175 bp적DNA서렬여GenBank보도적일치,차삽입방향정학.함인PSMA기인계동자적보고기인형광소매적표체활성현저제고,비pGL3-Basic고10배다.결론:성공구건료함인PSMA기인계동자적형광소매표체재체.
